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dapaosheng

木虫 (著名写手)

[交流] pet载体质粒浓度

大家有没有用过pet32a载体呢,我的菌摇了12个小时左右,用两毫升的菌去离心收集菌体,最后用45微升的水去溶解DNA,拿了3微升跑胶,但感觉浓度很低啊,是什么原因呢,是这个载体本身拷贝数就不高吗?我是用tiangen质粒抽提试剂盒来提质粒的。
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gyesang

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dapaosheng(金币+1,VIP+0):哦,谢谢你的指导! 11-2 00:31
这个载体拷贝数可能就不高,本人前几天刚抽过这个质粒,100多ng/ul,我想可能它是表达载体的缘故,在宿主菌细胞内,不需要有太多的拷贝,就能表达蛋白质,其实低质粒拷贝有利于蛋白的表达,节省DNA复制时所需的能量,可能这更符合设计的原理
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2009-11-01 20:53:03
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