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新虫 (初入文坛)

[交流] 萤火虫荧光素酶检测试剂盒常用样本类型

萤火虫荧光素酶检测试剂盒的常用样本类型主要有以下几种:

细胞样本

贴壁细胞:如 HeLa 细胞、HEK-293T 细胞等13。在实验中,通常需要先将细胞培养在合适的培养容器中,如培养皿、细胞培养板等。检测时,需吸去细胞培养基,用 PBS 等缓冲液缓慢轻柔地洗涤细胞,以去除残留的培养基,然后加入适量的细胞裂解液进行裂解,使细胞内的荧光素酶释放出来,用于后续检测。
悬浮细胞:例如白血病细胞系 K562 等。对于悬浮细胞,一般是先通过离心收集细胞,弃去上清液,再用 PBS 等洗涤细胞,离心后加入细胞裂解液进行裂解,进而获取含有荧光素酶的细胞裂解物用于检测3。
组织样本

动物组织:包括小鼠、大鼠等动物的各种组织,如肝脏、肾脏、脑组织等。首先需要将组织从动物体内取出,用生理盐水等清洗干净,去除血液等杂质。然后将组织剪切成小块,使用组织匀浆器等工具在合适的裂解缓冲液中进行匀浆处理,使组织细胞破碎,释放出荧光素酶。匀浆液经过离心等处理后,取上清液即可用于萤火虫荧光素酶的检测。
植物组织:像叶片、根、茎等植物组织也可作为样本。将采集的植物组织洗净、晾干后,称取一定量的组织,在液氮中研磨成粉末状,再加入细胞裂解液进行充分裂解,经过离心等步骤获取上清液,用于检测其中的荧光素酶活性。
细胞或组织的裂解物保存样本

如果不能及时进行检测,可以将细胞或组织裂解后,将裂解物保存在合适的条件下,如 - 20℃或 - 80℃冰箱,待需要时取出解冻进行检测234。但要注意避免反复冻融,以免影响荧光素酶的活性。
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