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汕头大学海洋科学接受调剂
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助:纯化后跑的蛋白电泳

我们前几天纯化了点蛋白,用的是柠檬酸体系,为什么纯化出来之后的蛋白(含量为3点多),跑电泳时含量显得特别的少。我们用样品处理液处理的时候,离心之后有沉淀,难道是盐浓度高对最后跑电泳有影响么?请问谁知道这个是怎么哥原因?最后出来的纯品盐浓度为0.6mol/L!
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I am not a hero , but I served with heroes!
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heroxuning

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
盐浓度太高了 就算跑出来的图也很难看
3楼2009-10-31 11:30:17
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nn0808

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对,没错,就是盐浓度太高了,导致电泳时样品中的带电粒子除了蛋白分子之外还有大量的无机盐离子,这样对电泳是非常不利的.另外高浓度的盐不利于蛋白质的溶解,也就是发生盐析作用,导致样品中的蛋白浓度降低影响电泳.
2楼2009-10-31 00:00:58
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by wlt728 at 2009-10-30 22:32:
我们前几天纯化了点蛋白,用的是柠檬酸体系,为什么纯化出来之后的蛋白(含量为3点多),跑电泳时含量显得特别的少。我们用样品处理液处理的时候,离心之后有沉淀,难道是盐浓度高对最后跑电泳有影响么?请问谁知 ...

那我应该怎么办呢?
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4楼2009-11-06 20:27:32
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