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tarasland7

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[求助] RNase H体外切割实验中RNA:DNA杂合双链怎么制备?

RNase H体外实验中RNANA杂合双链怎么制备才能做出好的效果图,感谢,跪求,可有偿咨询

RNase H催化降解RNANA杂合双链中RNA链的效果图。使用RNase H,在20µl反应体系(50mM Tris-HCl pH8.3, 75mM KCl, 3mM MgCl2, 10mM DTT)中,加入400ng RNANA杂合双链,以及图中指定量的本产品或国外N公司的RNase H,37ºC孵育20分钟进行反应,反应完毕后立即冰浴3-5分钟并加入1μl 0.5M EDTA以终止反应。取出5μl反应液,加入1μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),然后进行15%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(180V电泳45分钟)之后,用NA-Red (D0128/D0130) (1:2000稀释)室温染色7分钟,随后拍照观察结果。
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