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jiang沙沙

新虫 (初入文坛)

[交流] 用ELISA测血清效价时隐性空值很高

我用ELISA测血清效价(兔原)阴性值很高,师姐说我的实验不成功。5微克/毫升包埋,0微克/毫升包埋后,免疫前血清分别1:100和1:10000 PBS稀释;二抗为养抗兔1:10000 PBS稀释。
5微克/毫升1:100值为1.3 ;
5微克/毫升1:10000 值为0.2 ;
0微克/毫升1:100值为0.8  ;
5微克/毫升1:10000 值为0.2
免疫后血清按1“10;1:100;1:1000;1:10000稀释
1:10稀释测的值在1.2左右
1:100测的值在1.9左右
1:1000测的值在2.1左右
1:10000测的值在2.2左右
请问为什么我的阴性值用1:100稀释时会这么高。我用PBST洗板3~5分钟,3~5次
师姐说高于0.5都不能算隐性。
我免疫后的血清在1:10时会什么这么低是浓度太高抑制了吗?

[ Last edited by 350784478 on 2009-11-9 at 22:25 ]
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个不好说吧?是不是在平台期?
生物资源交流QQ群:1044518333
2楼2009-10-29 21:25:54
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jiang沙沙

新虫 (初入文坛)

为什么免疫前血清值1:100稀释这么高

谢谢您!平台期什么意思,现在我的主要问题是免疫前血清的值很高,为什么。
3楼2009-10-29 21:37:04
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zyzlyl

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你做了空白对照了吗?有肯能是显色液的它本身也有吸光值的。
比如你的:0微克/毫升1:100值为0.8
外面没有别人……
4楼2009-11-05 11:07:23
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