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diaoyuhua

金虫 (小有名气)

[交流] PCR电泳时loading buffer的作用

两个作用:
1、里边的成分甘油帮助样品沉降入点样孔中,防止样品到处漂
2、里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,溴酚蓝条带的位置差不多相当于20bpDNA片段,二甲苯酚条带的位置相当于2KbpDNA片段。。。跑在最前面的是溴酚蓝。。。
另外,有的Buffer是加有SDS的,一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。

[ Last edited by amisking on 2009-10-30 at 12:27 ]
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vivihao

金虫 (小有名气)

求是了一下~


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
更正一下:不是二甲苯酚也不是二甲苯氰而是二甲苯青FF;关于条带的大小与电泳的时间的长短以及胶的浓度大小有关,电泳时间越长,溴酚蓝的条带的位置越小,40分钟大约是不到几十bp的样子;胶的浓度大,溴酚蓝条带大小就越大;一般电泳30分钟,1.5%的胶,溴酚蓝条带大小一般为100左右的样子;
二甲苯青FF条带大小也是与电泳时间胶浓度有关,一般大小为2kb左右。
10楼2009-10-30 14:16:58
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.2):抢了个小板凳,给个红包
楼主这是资源啊
将有能量帮助他人作为自己的人生追求!
3楼2009-10-29 19:32:39
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liangopl

新虫 (初入文坛)

好东西啊!分享啦!
6楼2009-10-29 20:15:28
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-31 10:41
溴酚蓝条带的位置差不多相当于200 bpDNA片段。如果是20 bp,会迅速跑出胶,不能取到指示作用。
另外,二甲基本氰FF,不是二甲基苯酚。
Thank-you,so-blue.
7楼2009-10-30 09:18:12
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