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diaoyuhua

金虫 (小有名气)

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[交流] PCR电泳时loading buffer的作用

两个作用：
1、里边的成分甘油帮助样品沉降入点样孔中，防止样品到处漂
2、里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用，溴酚蓝条带的位置差不多相当于20bpDNA片段，二甲苯酚条带的位置相当于2KbpDNA片段。。。跑在最前面的是溴酚蓝。。。
另外，有的Buffer是加有SDS的，一般都会写明。SDS主要是促使聚合酶变性，因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率。

[ Last edited by amisking on 2009-10-30 at 12:27 ]

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1楼2009-10-29 19:25:25

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vivihao

金虫 (小有名气)

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求是了一下~

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

更正一下：不是二甲苯酚也不是二甲苯氰而是二甲苯青FF；关于条带的大小与电泳的时间的长短以及胶的浓度大小有关，电泳时间越长，溴酚蓝的条带的位置越小，40分钟大约是不到几十bp的样子；胶的浓度大，溴酚蓝条带大小就越大；一般电泳30分钟，1.5%的胶，溴酚蓝条带大小一般为100左右的样子；
二甲苯青FF条带大小也是与电泳时间胶浓度有关，一般大小为2kb左右。