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新虫 (初入文坛)

[求助] Gateway Cloning

有无大佬帮我,Gateway Cloning LR反应部分链接不成功,可以大概确定问题出在destination vector上,影响该部分成功率的因素有哪些?

Gateway Cloning


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wangqi1107

银虫 (小有名气)

LR 反应是自己配的试剂还是买的公司的试剂盒?entry和destination载体比例3:1左右,反应时间稍长一点,反应完转化的时候,反应产物全部加入感受态细胞,全部涂板。
2楼2024-12-06 09:34:14
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DeepIearning

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangqi1107 at 2024-12-06 09:34:14
LR 反应是自己配的试剂还是买的公司的试剂盒?entry和destination载体比例3:1左右,反应时间稍长一点,反应完转化的时候,反应产物全部加入感受态细胞,全部涂板。

感谢回复。是公司试剂盒,反应时间是在常温过夜,以前涂板的时候涂100u,剩下100u放4℃备用的

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3楼2024-12-09 23:00:04
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