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Spotl1ght

新虫 (初入文坛)

[交流] PEG修饰蛋白实验求助 已有1人参与

用等质量浓度的mPEG-SC和丝素蛋白,4摄氏度下搅拌24h,有白色固体析出;在20摄氏度下搅拌,大约30分钟也出现了同样的现象。请问有高手可以指点一下吗?

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Spotl1ght

新虫 (初入文坛)

2楼2024-11-21 20:56:44
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zhzh0731

金虫 (小有名气)


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是不是盐析出,无机缓冲液换成有机缓冲液试试
3楼2024-11-25 09:12:59
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Spotl1ght

新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by zhzh0731 at 2024-11-25 09:12:59
是不是盐析出,无机缓冲液换成有机缓冲液试试

感谢,我尝试一下。另外,产物的AFM结果和PEG、丝蛋白直接混合的AFM结果差不多,我怀疑是没反应成功,请问这个反应还有其他的注意事项吗?
4楼2024-11-26 14:41:12
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zhzh0731

金虫 (小有名气)


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4楼: Originally posted by Spotl1ght at 2024-11-26 14:41:12
感谢,我尝试一下。另外,产物的AFM结果和PEG、丝蛋白直接混合的AFM结果差不多,我怀疑是没反应成功,请问这个反应还有其他的注意事项吗?...

有没有反应你可以看看液相和凝胶电泳,这个相对比较直观,蛋白析出反应效果肯定不理想
5楼2024-11-26 16:00:15
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Spotl1ght

新虫 (初入文坛)

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5楼: Originally posted by zhzh0731 at 2024-11-26 16:00:15
有没有反应你可以看看液相和凝胶电泳,这个相对比较直观,蛋白析出反应效果肯定不理想...

谢谢!
6楼2024-11-27 09:45:20
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhzh0731 at 2024-11-26 16:00:15
有没有反应你可以看看液相和凝胶电泳,这个相对比较直观,蛋白析出反应效果肯定不理想...

不好意思又来打扰了,丝素蛋白的等电点大概在2-3,pH=8的PBS是不是影响不大呢?因为我查了一下很多文献都是用pH=7-9的PBS做的。
7楼2024-11-28 09:38:17
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zhzh0731

金虫 (小有名气)


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7楼: Originally posted by Spotl1ght at 2024-11-28 09:38:17
不好意思又来打扰了,丝素蛋白的等电点大概在2-3,pH=8的PBS是不是影响不大呢?因为我查了一下很多文献都是用pH=7-9的PBS做的。...

这个蛋白没有用过,要不你降低蛋白的浓度尝试
8楼2024-11-28 17:24:39
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