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dapaosheng

木虫 (著名写手)

[交流] PET载体表达蛋白

各位有没有用过PET-32a(+)载体来表达过蛋白呢,我想知道这个载体能表达出分子量多大的蛋白,我有一个蛋白,分子量为30kDa左右,不知道能不能用PET-32a(+)来做表达,请各位指教一下。
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speculiar

银虫 (小有名气)

能不能表达试了才知道啊 呵呵
2楼2009-10-29 00:00:39
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

分子量不是决定因素
3楼2009-10-29 08:32:44
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houcaixia

金虫 (小有名气)

我们也是用的PET-32a(+)表达蛋白,刚开始表达不出来,后来换了一个受体菌,表达量相当高,所以,PET-32a(+)载体对表达可能有影响,但是影响表达的因素是很多的,你可以试一下,不行了再换载体呗
4楼2009-10-29 09:38:27
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

30kDa不是问题,影响因素还有很多。
5楼2009-10-29 10:15:28
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

houcaixia  
请问用的什么受体菌,我们现在用BL21(DE3),表达不出来,正准备换换菌种,谢谢
6楼2009-10-29 12:57:51
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

跟蛋白大小关系不大。跟基因序列的稀有密码子含量,蛋白的二硫键多少,蛋白来源的物种,亲疏水性等因素相关性更大。
一般来说需要不断尝试。并不断优化诱导条件。实在做不出来再换载体。可以尝试融合表达。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
7楼2009-10-29 13:12:24
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖

PET-32a(+)载体能表达分子量在20-94kDa的蛋白
8楼2009-10-29 13:32:12
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bioxixi

木虫 (著名写手)

只从大小来分析,当然是可以的了

呵呵 你在小木虫搜搜 pET表达手册,看看就明白了
9楼2009-10-29 13:53:32
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