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heqin-1985

银虫 (小有名气)

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[交流] 请问摇瓶发酵培养基里的沉淀怎么除去啊？

配的摇瓶发酵培养基，杀菌前还比较澄清，杀菌后就出现好多沉淀，请问是怎么回事？还有怎么才可以避免啊？杀菌后量大过滤不怎么方便，不知道怎么办。请教一下大家。O(∩_∩)O谢谢！

PS：培养了24小时的菌体，放置两天出现沉淀分层现象，以前没有过，这是不是说菌体长的不好啊？

摇瓶种子培养液（g/L）：
甘油 30、NH4Cl 2.0、酵母膏 3.0、KH2PO4 3.4、MgSO4•7H2O 0.2、CaCl2 0.1、柠檬酸0.42g/L、微量元素溶液2mL/L。
是克雷伯杆菌。
微量元素溶液：有CuCl2、H3BO3、MnCl2、Na2MoO4、NiCl2、ZnSO4

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1楼2009-10-28 12:08:04

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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖

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★
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培养基的成分之间会产生反应，生成沉淀，建议你把易产生沉淀的分开灭菌，然后在超净工作台上再加到一起。
如：低浓度下，无沉淀，因为生成少量的Mg（H2PO4）2，是可溶物！
但是高浓度下，则会出现沉淀！
因为磷酸二氢钾会电离：KH2PO4==K+ + （HPO4）2- + H+
生成的磷酸氢根与硫酸镁结合生成很少量的MgHPO4沉淀
所以：2KH2PO4+MgSO4===MgHPO4（沉淀）+K2SO4+ H3PO4