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owihzgnahz

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于大肠杆菌感受态的制作 已有1人参与

小弟目前在做双质粒系统的crispr-cas9,菌种是看-12 mg1655。遇到的问题是在转第二个质粒时转化效率极其低,一个板长三五个甚至不长(化转电转都是)。做感受态时会使用分光光度计测od600,在1%接种量下,有peccas质粒的菌长四个小时才能长到0.4左右。我想问一下这个速度是正常的吗?长两个小时左右给师兄师姐看——他们都是要两个小时就做不测吸光度,他们说就够了,但一测od也就0.2-0.3。是我们的机器测出来偏小?

@youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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strongFv

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1%的接种量,这个OD值是正常的。感受态长得少可能确实跟感受态效率有关系的,可能做的时候一次好一次不好。试试擎科的超感看看,是化转的方式,但是电转级别的高转化效率,成功率会高一些也稳定一些。
2楼2024-11-24 19:22:47
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