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lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] DNA小片段回收问题

100bp左右的小片段大家是怎么纯化回收的啊,回收率怎么样啊?
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天

用纯化回收试剂盒,上海生工就有卖的
海到尽头天做岸,山登绝顶我为峰。
2楼2009-10-28 11:15:10
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yinhuali123

银虫 (小有名气)


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Originally posted by lihaoexe at 2009-10-28 10:42:
100bp左右的小片段大家是怎么纯化回收的啊,回收率怎么样啊?

直接用纯化试剂盒提取就行,注意要添加异丙醇
3楼2009-10-28 15:49:16
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
手动挤胶也可以啊,用醋酸钠,酒精沉淀,加glycogen助沉
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2009-10-28 16:01:18
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xj22667

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
加乙酸钠和异丙醇有助于小片段的回收 效果不错 我试过的 同时可以多反吸几次增加DNA的结合率 最后洗脱时也应反吸三次以上
5楼2009-10-28 16:01:20
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


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Originally posted by lihaoexe at 2009-10-28 10:42:
100bp左右的小片段大家是怎么纯化回收的啊,回收率怎么样啊?

有专门用于回收小片段的试剂盒,回收效率效果还是很好的。
6楼2009-10-28 16:04:33
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hyde0706

木虫 (正式写手)

切胶回收或者用试剂盒,损失比大片段还是多一些的。
7楼2009-10-28 16:40:29
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zier1011

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by xj22667 at 2009-10-28 16:01:
加乙酸钠和异丙醇有助于小片段的回收 效果不错 我试过的 同时可以多反吸几次增加DNA的结合率 最后洗脱时也应反吸三次以上

借楼主光,学习了,在小木虫上逛,总会有意想不到的收获
花还香香的
8楼2009-10-28 17:10:58
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xj22667

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zier1011 at 2009-10-28 17:10:

借楼主光,学习了,在小木虫上逛,总会有意想不到的收获

哈哈 大家互相帮助嘛
9楼2009-10-28 17:53:59
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lihaoexe

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xj22667 at 2009-10-28 16:01:
加乙酸钠和异丙醇有助于小片段的回收 效果不错 我试过的 同时可以多反吸几次增加DNA的结合率 最后洗脱时也应反吸三次以上

加多少乙酸钠和异丙醇呢?
10楼2009-10-28 18:08:05
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