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卡卡blue

新虫 (初入文坛)

[求助] 羧基聚苯乙烯微球偶联抗体

我想请教一下,我用多抗化学偶联羧基胶乳微球,抗体等电点5~6,微球先在MES中用EDC、NHS活化,清洗后偶联抗体:第一种:在pH6.0的100mM MES中偶联,加入抗体后发现很快就出现絮状聚集,偶联3h后超声,前几次超开过,后来做了几次一直超不开;第二种:在pH7.4的100mM PBS中偶联,加入抗体后未发现聚集,但是偶联3h后离心,发现离心不下来(离心力和清洗裸微球时用的一样大,清洗时可以离心下来)。请问在第一种方法中出现聚集的原因是什么呢,第二种方法中为什么偶联抗体后会离心不下来?十分困惑,非常期待您的解答!

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