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抗原聚集并且裂解,怎么破?
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各位,情况是这样的: 我设计了一个重组抗原,分子量大约59KD左右,pET-32a(+), BL21表达菌,Amp抗性,His标签。 抗原刚纯化出来,电泳只有一条带就在59KD附近。 但是,4℃放置3-4周,出现2个问题:1、有明显的絮状物漂在溶液里面,还比较多;2、跑电泳,目的条带几乎看不见了,存在多条杂带,分别在52KD、30KD、27KD、22KD、20KD处。第1个问题,可能是保存液的问题,我目前还在优化;第2个问题,应该是抗原裂解了,但是为什么呢?想不通。当然,也有可能第1个问题与第2个问题相关。 所以,想请教各位,以前有没有碰到类似的现象,出现这个问题的原因可能有哪些。 望大家给点意见,不胜感激。 |
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