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博莱霉素致大鼠间质性肺病模型的构建
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肺间质纤维化(pumlonary interstitial fibrosis)是一种慢性炎症间质性肺病,以肺泡巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞在末端肺泡聚集,实质细胞损伤、肺泡纤维化为特征。其病因及发病机理尚不清楚,5年生存率不超过50%,目前尚无特效的治疗方法。因此进一步研究其发病机制、寻找有效的治疗方法,已成为许多国内外研究的热点。 1、实验动物 Wistar大鼠,雄性,6-8周龄,体重(200±20)g 2、造模方法 雄性Wistar大鼠用10%水合氯醛,4ml/Kg体质量腹腔内注射。待大鼠麻醉后,将其仰卧位固定在鼠板上,头低位暴露声门,水平插入16号静脉套管针,到达咽喉部时,压低针尾,插入气管,拔出针芯。大鼠经气管内一次性灌注博莱霉素药液5mg/kg。注入后立即将大鼠直立旋转,以便于液体均匀在肺内散布,制成间质性肺病模型。动物清醒后随意进食,观察28天。 3、观察指标及检测方法 1、大鼠一般情况观察 每天观察大鼠的活动度、对外界反应的灵敏度、大鼠的皮毛光泽、口唇鼻颜色、体重、饮食、呼吸、死伤等情况。 2、病理学观察 大鼠用10%水合氯醛溶液(4ml/kg)进行麻醉后,取新鲜右肺下叶组织200g,用PBS缓冲液对肺组织周围的血液等污物进行冲洗,经10%中性福尔马林48小时充分固定后,再通过梯度酒精进行脱水,再通过二甲苯进行透明,石蜡包埋,间断4μm切片4张,常规HE染色,光镜下观察肺组织。 |
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