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质粒载体和病毒载体有哪些异同？
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从理论上来说，载体的构建没有太大的技术难度，但是它的成功与否有时候是一个玄学的过程，有一定程度上的运气成分，有时候“胡乱”操作一通反而莫名其妙地构上去而且转化成功了。那么在具体的应用中，质粒载体和病毒载体有哪些异同？ 01 进入细胞方式不一样质粒通过转染进入目的细胞，病毒通过感染进入目的细胞，特异性更强，且效率更高。 02 所搭载的序列形式及其发挥功能的方式可能不一样质粒DNA所搭载的目的序列是DNA，并且DNA通常需要进入细胞核才能行使相应的功能；病毒载体搭载的序列可以是DNA，也可以是RNA，而RNA序列通常不需要入核行使功能，并且如果是进行宿主基因组的同源重组，病毒载体效率更高。 03 包装、提纯方式不一样质粒通常是在原核细胞内进行扩增后提纯；病毒载体通常在真核细胞内包装后逐步扩大培养后裂解细胞/收集上清后提纯获得。 04 保存方式不一样质粒通常稳定性非常好，对温度不敏感； 病毒不一样，一般需要低温冷冻保存对温度很敏感，反复冻融对活力影响也非常大。 05 在疫苗应用不同质粒DNA作为DNA疫苗的载体，通常免疫原性较低，需要使用脂质体或者电击枪用于增强DNA进入细胞； 病毒载体疫苗免疫原性较好，通常很容易诱导较强的抗体和T细胞免疫原性，但往往受限于预存免疫。 |
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