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分子克隆,测序结果双峰
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将带有stem loop的重复序列,插入目标载体后,挑点测序多次,结果一直是双峰,求问有什么好的解决办法吗
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这种存在结构的序列就是不好测序,跟公司说清楚让他们搞优化或者换公司再试试吧
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如果是全部双峰,可以先做个单克隆菌P,电泳看下条带是否单一、大小是否正确,再送测序。PCR做得少的话,可以直接用菌P专家(TSE005)之类的快速菌P酶鉴定,方便一些。
如果只是小段或者个别碱基的双峰,可能就是双链插入或者变异的情况不一致了。
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nono2009
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gordon399
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三磷酸-腺苷
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