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新虫 (小有名气)


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分子克隆,测序结果双峰
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将带有stem loop的重复序列,插入目标载体后,挑点测序多次,结果一直是双峰,求问有什么好的解决办法吗

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金虫 (小有名气)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这种存在结构的序列就是不好测序,跟公司说清楚让他们搞优化或者换公司再试试吧
12楼2024-09-12 10:59:01
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strongFv

新虫 (初入文坛)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是全部双峰,可以先做个单克隆菌P,电泳看下条带是否单一、大小是否正确,再送测序。PCR做得少的话,可以直接用菌P专家(TSE005)之类的快速菌P酶鉴定,方便一些。
如果只是小段或者个别碱基的双峰,可能就是双链插入或者变异的情况不一致了。
13楼2024-11-24 19:29:08
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tzynew2楼
2024-09-10 21:08   回复  
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XG-WUST4楼
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bodygb7楼
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zx9282138楼
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nono20099楼
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gordon39910楼
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