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手把手教你功能性消化不良动物模型构建
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功能性消化不良是消化科最常见的一种非器质性胃肠病，百姓口中所说“消化不良”多指此病，其可占消化科门诊人数的40％～50％。临床表现包括进餐后不久即出现饱腹感，上腹胀痛，烧灼感，通常还伴有打嗝、反酸等症状，而部分患者情绪还可能存在焦虑及抑郁的表现。该病在全球范围内的总患病率为11.5%～14.5%，而在我国的患病率约为23.5%。由于此病难以用器质性病变解释相关症状，且临床病因及发病机制尚未完全明确，因此为临床治疗带来一定困难。所以建立合适的动物模型迫在眉睫。一、动物的选择 大鼠是比较常选择的实验动物。 二、造模方法 1、碘乙酰胺灌胃法 碘乙酰胺灌胃法是目前国际上较为公认的FD造模方法。造模方法：SD大鼠7d起, 给予0.1%碘乙酰胺与2%蔗糖的混合液0.2mL灌胃, 1次/d, 持续6d, 后正常饲养, 至大鼠8-10wk时造模完成。 评价：碘乙酰胺灌胃造模法已成为国际公认的方法，较好地模拟了胃敏感性升高、顺应性降低等病理表现。通过应用恒压器进行模型评价, 也是相对客观的评价方法。 2、夹尾应激法 “夹尾刺激法”是目前国内应用最多的FD造模方法。造模方法：用长海绵钳夹大鼠尾巴远端1/3处, 以不破皮为度, 令其暴怒并与同笼其他大鼠厮打, 每次刺激30min, 每隔3h刺激1次, 4次/d, 连续7d结束。为避免因抓伤引起感染, 每次造模结束后用0.5%的碘伏涂擦大鼠受伤部位。7d后出现进食量减少, 胃排空率降低, 且可见动物紧张易怒, 体形渐瘦, 溏便, 毛发枯黄, 暗哑毛糙。 改良后的造模方法：研究者在上述模型基础上进行改良, 将夹尾次数调整为2次/d, 夹尾时间为30 min/次, 总共刺激时间延长至3wk。 评价：相对于持续1wk的郭氏夹尾刺激法, 改良后的3wk夹尾刺激法更加符合FD的慢性发病过程。三、张氏不规则喂养及饮用酸化水法 造模方法：选取健康成年Wistar大鼠，按自行设计的不规则喂养方法饲养4周，其中实验组动物单日正常进食、双日禁食，自由饮水，并在水中加入盐酸(每100ml水加10N盐酸1ml) 以破坏胃内酸碱平衡。观察实验组动物，90%出现胃电节律失常，异常节律指数达36.67%，且无明显器质性病变，证实造模成功。该方法可用于FD中脾气虚弱证型模型的制作。四、不规则喂养及饮用酸化水法的改良法 主要存在三种方法。 1、不规则喂养联合酸化水法，并在此基础上附加第三种方法进行联合造模。造模方法：在不规则进食、饮用酸化水的基础上，联合劳倦过度法进行FD大鼠脾胃虚弱型的动物模型制造，其中劳倦过度法采用游泳消耗体力法，即在22℃水温中令动物游泳至连续“冒泡”5次终止，每日2次，间隔5h，连续造模2周。观察模型组出现体重下降、饮食减少、大便软溏、毛发枯乱、活动减少等表现，证明造模成功。 2、单独选用不规则喂养法联合应用他法进行造模。造模方法：采用在不规则喂养的同时加入超声波噪音刺激的方法制作FD小鼠模型，具体方法为单日进食、双日禁食，于每日(8:00－20:00)将超声波清洗机放置鼠笼附近，每2h进行1次噪音干扰，每次噪音刺激持续30min，并以每笼中至少有1只小鼠出现撕咬等激惹表现为度，造模期间自由饮水，持续造模14d。观察模型组小鼠进食量与体质量明显下降、胃内残留率升高、小肠推进率降低(与正常组比较差异均有统计学意义) ，证明造模成功。 3、单独选用饮用酸化水法或改良酸化水法。造模方法：采用盐酸灌胃的方法制造胃虚饮停型FD大鼠的动物模型，具体方法为给予模型组大鼠温度为0℃、浓度为0.5mol/L盐酸(用量按0.8ml/100g) 灌胃，而正常组大鼠给予常温下的自来水(用量按0.8ml/100g) 灌胃，每日进行1次，造模2周。 |
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