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常见的核酸提取方法
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8种常见的核酸提取方法基因作为生物遗传信息的载体，通过基因检测，大众能够发现身体内潜在的疾病风险，及早采取预防或干扰措施。基因是遗传的基本单元，是产生一条多肽链或功能RNA所必需的DNA片段。 而做好基因研究的第一步就是获取核酸，核酸提取通常是开启生物学研究的第一步，而且提取的核酸质量高低也是决定下游实验成败的关键因素之一。无论后续的克隆、PCR、QPCR、建库测序等等都需要核酸才能顺利进行。核酸提取的基本原理 核酸分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。DNA主要集中在细胞核内，线粒体和叶绿体中，而RNA主要分布在细胞质当中。 核酸作为基因表达的物质基础，是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究，首先都需要对核酸进行提取和纯化。核酸提取为大量广泛研究和应用提供了基础。 基本步骤 1、裂解细胞，释放核酸。使用裂解液破坏样品细胞结构，从而使样品中的DNA游离在裂解体系中; 2、核酸的分离与纯化。需要将与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子和其他不需要的核酸分子去除; 3、核酸的浓缩、沉淀; 4、纯化核酸。纯化则是使DNA与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 核酸提取纯化原则和要求 1、需要保证核酸一级结构的完整性，为下游实验做准备; 2、排除其它核酸分子的污染(提取DNA时排除RNA的干扰，反之亦然); 3、核酸样品中没有对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子; 4、将核酸样品中其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染降到最低程度。 |
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