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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 长片段扩增用什么酶？
汕头大学海洋科学接受调剂
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

[交流] 长片段扩增用什么酶？

如题，我要扩增一个长片段10K左右，需要用什么酶扩增，效果会好点？EXtaq或者是LA taq 能扩增这么长的片段吗？
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1楼 2009-10-26 17:30:17
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yinhuali123

银虫 (小有名气)
LAtaq?
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2楼2009-10-26 20:22:02
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黑罕

金虫 (小有名气)
我选择ex-taq
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3楼2009-10-26 20:29:08
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jjlbest

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好用LAtaq酶，但是为什么不分段扩增呢，这样不是更容易拿到序列吗？
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4楼2009-10-26 20:49:57
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刘一笑

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pfu酶，保真度，扩增长度都可以
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真实的活着，真实的追求，真实的享受，每一天的存在感
5楼2009-10-26 21:09:59
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
LA taq     我做过。  记得优化pcr反应。
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6楼2009-10-26 21:15:00
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崔红利

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用LAtaq  试试吧  我以前用过的  效果不错
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7楼2009-10-26 21:29:04
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-27 08:42
不考虑takara的酶……
做克隆还是考虑Invitrogen的东西吧
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8楼2009-10-26 21:46:49
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caoliang38

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 黑罕 at 2009-10-26 20:29:
我选择ex-taq

最好用一步法 保证你的序列是完整的 如果使用融合PCR的手段的话，不能绝对保证序列的同源性
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9楼2009-10-26 22:40:00
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jjlbest at 2009-10-26 20:49:
最好用LAtaq酶，但是为什么不分段扩增呢，这样不是更容易拿到序列吗？

额，准确来说呢，我是只有这个基因最后一个结构域的序列，想的是用LA-PCR一直往前端P，希望能获得它的全长吧。。。但是这个基因有点长，偶有点担心，不知道LA-PCR有没有这么好的效率。。。。
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10楼2009-10-27 08:39:02
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