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求助：关于高效液相色谱在排气泡过程漏液的原因已有1人参与
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（1）使用高效液相（HPLC）排空管路气泡时，流速一旦升到5mL/min，泵就会出现漏液的情况。使用a泵时，a泵漏液b不漏。使用b泵时，a、b都漏。漏液位置是密封垫那里，但密封垫和陶瓷密封垫固定件皆新买（拆机的时候发现陶瓷固定件一边出现破碎，导致密封垫被压扁）。 （2）二元泵的seal wash为[OFF]，平时两根软管也插在装有10%异丙醇的瓶子里。但在排查过程中，发现接在a泵的那根软管向外流流动相（甲醇），接蠕动泵的那根软管管路里存在大量气泡。 想问问大家这其中可能存在何种原因啊？  |
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天之翼h
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【答案】应助回帖
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漏液的原因分两种： （1）接触硬件不当 在更换零件如流路管或换柱时，换的接头接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的，甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选用PEEK接头是一个较好的解决方法，不仅通用性好，而且靠手拧就能保证不漏液。 即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不当也会漏液，一种不当就是力度把握不好，拧得太紧或太松；另一种不当就是致命的错误：滑丝，这是往往是动手能力不太强，螺丝钉很少拧的工作者犯的错误，滑丝的后果不仅是漏液那么简单，常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验，那就是拧螺丝。 （2）使用仪器不当 如果是输送泵漏液，最常见的原因就是在活塞位置缓冲盐析出造成。析出的原因有两个，一是使用缓冲盐溶液时突然加入了纯甲醇而析出，这种错误很容易避免，这是尽量不要用纯的甲醇和纯水。只要互相有10％的比例就不会出现这个问题。另一原因是在用缓冲盐溶液（不论甲醇含量有多少）作流动相时，实验结束后没有换甲醇水冲洗，使得微渗的流动相干燥形成晶体造成。 不过，输送泵漏液并不是非得马上修不可，冲洗干净并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。 检测器漏液是个很麻烦的事，一般都是吸收池的问题，更换的费用相当高。但是并不是说一定要马上更换，还可以从实际实验效果看能否凑合使用。 二、漏气 漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部的气体进入液相色谱仪的流路内部形成了气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。 （1）过滤头 抽液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气（需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率），如果已经脱了气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。处理方法比较简单，拧下过滤头在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去即可。 （2）透明流路管 指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡，而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知，以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因（我们做液相一定要有“微渗”的概念）。如果长时间不用，这一段管路的液体会彻底干掉，而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出的。 这种情况对于输送泵很危险，因为泵从设计来说是输送液体而不是气体，内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用，如果活塞杆上还残存了一些缓冲盐，则极易拉伤，造成不可逆转的影响。 对于这种情况，要突出“预防为主”如：，液相色谱使用人员要相对固定和稳定，工作中合理搭配资源，每台机一周击至少作一次实验，如长期不用起码每周要冲流动相2 小时。养成良好的工作习惯很重要。 如果不慎出现了这种问题怎么办？我的建议是用外力使管路中充满液体。具体如下： 1、找到流路管进入输送泵的接头。 2、拧下来。 3、用一干净的洗耳球的尖端对准管路的平整切口。 4、吸液体，看液面从流动相瓶里上升，至离洗耳球5 厘米左右时停止该动作。 5、快速把接头拧回输送泵上（这个过程可能会有少许流动相外泄，这是正常现象）。 6、 开机，打开排液阀门，启动输送泵。 7、等排液管中流出的溶液没有气泡时，再关闭排液阀，仪器正常工作。 （3）输送泵和柱子 这些部分进了气泡一般不怕，冲掉就行。 （4）检测器 应该说，整个流路中只要有一个气泡都会在检测器上得到强烈的信号反映，检测器内部的气泡一般都能被冲走，但也有很难冲掉的残留气泡的情况。 如果检测器里有残留气泡，会有特征明显的表现形式，就是在走基线时会时不时间隔出现直上直下信号很大的信号峰。这时先看普通流量能否冲走，如果冲不走，那唯一的办法就是拆柱，把检测器直接连到输送泵的出口，加大几倍流量冲洗，则肯定能冲走气泡。 |
xzzhit2楼2024-08-02 08:57:07
3楼2024-08-02 10:28:14