应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 补料发酵方面的问题
132/2返回列表上一页12
查看: 3993  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者wjny将赠送您 3 个金币

waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售

【答案】应助回帖

引用回帖:
10楼: Originally posted by wjny at 2024-08-11 21:02:48
感谢回答，我还想问两个问题。
1. 单位od表达量应该是相对菌体量来说的吧，单位应该是g/g（生物量），这相比于浓度g/L为什么更合适呢？
2.在工业上对于培养基碳源氮源等成分的优化中自然不需要太严格的要求，但是在 ...

单位OD表达量。和湿重表达量，单位体积表达量等等都一样，都是需要将样品重悬到一定体积，然后去检测重悬后样品中目标蛋白浓度， 都可以换算出整个发酵体积的目标表达总量。

但是，单位OD表达量，无论哪个发酵时期，样品量都是恒定都OD值。排除了菌体增长过程菌体量增加对 表达产率都影响。比如发酵终点OD是100.  发酵过程OD为1、5、10、50、100的时候都取样。 如果固定取100OD样品，这几个点取样体积就是100ml，20ml、10ml、2ml和1ml，统一离心并重悬到5ml，就制备成浓度20OD的样品。
如果以体积为单位，每个点取样2ml，这五个点样品OD就是2、10、20、100、200，统一离心并重悬到5ml，得到OD浓度就是0.4、2、4、20、40.这几个样品之间蛋白量差异并不是表达产率都差异，还包括菌量的差异早晨的产量差异。 不能真正反应菌都表达效率。



第二个问题您考虑的是。但是单因素还是多因素是可以转换的。但是单一原料无论成分是否复杂，是可以只当一个因素考虑的。因为你也无法改变这原料都成分。如果您能改变里面的成分配比，您就可以当多因素来做。
其实这些细节就是发酵的优化点，发酵优化过程主要是摸索菌体生长和蛋白表达的平衡关系。 菌长快了表达率低，菌体少了表达量少，既要菌体长，又要表达率不低，菌体量也要稳步增加。

前期生长过程比生长速率可以快点，进入表达阶段，可以通过调节pH、DO、温度和补料，降低比生长速率。让菌稳步生长，也稳步表达。



上游我原核还是做过一些实验。下游蛋白纯化做的更多一点。
你是学校还是企业，下游纯化也要做吗？
赞一下 回复此楼
11楼2024-08-13 22:10:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

草木贲华

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wjny at 2024-08-11 21:02:48
感谢回答，我还想问两个问题。
1. 单位od表达量应该是相对菌体量来说的吧，单位应该是g/g（生物量），这相比于浓度g/L为什么更合适呢？
2.在工业上对于培养基碳源氮源等成分的优化中自然不需要太严格的要求，但是在 ...

1. 用g/g是对应产物提取纯化阶段的，因为产物普遍在胞内，需要把菌体裂解且不破坏产物。因此对于破碎菌体，提取产物的工业流程来书，单位菌体的产物量才决定了工作量（比如我想要100 g产物，需要裂解多少菌体）。而一般在生产阶段，发酵的物料成本只有纯化步骤的几十分之一，因此对于整个生产来说，g/g高意味着纯化成本更低，意味着生产成本更低；g/L可以通过多发酵几次来解决。
2. 因为有机N源本身也是C源，尤其是最常用的酵母粉和蛋白胨，甚至不同牌子和批次之间也有差异；同时大肠杆菌发酵过程很难舍弃有机N源，这就决定了很难去讨论单因素。
赞一下 回复此楼
12楼2024-10-09 14:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hebsmile

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

发酵调控是多因素作用的结果，一个因素变化，可能会引起其他方面的多个变化，所以调控要全面去考察定义，更多的时候是看趋势，而不是单个变量。
赞一下 回复此楼
13楼2024-11-12 15:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wjny 的主题更新
132/2返回列表上一页12
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 3/150 2026-08-07 21:49 by shalamu
[基金申请] 基金中了 +13 laoda193707 2026-08-06 13/650 2026-08-07 20:33 by tchen18
[基金申请] 关于filecode +3 布布和一二 2026-08-07 6/300 2026-08-07 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭