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lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] 两端引物一样可以p出来吗?请教

如题,在片段两边加相同的接头,引物一样,PCR效果怎么样啊?
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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350784478(金币+1,VIP+0):感谢回帖交流 10-26 19:10
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2009-10-25 21:37:
如题,在片段两边加相同的接头,引物一样,PCR效果怎么样啊?

楼主的意思是“两端引物一样”还是“引物两端一样”啊?同一个片段它的两端应该是不一样的吧,怎么能用相同的引物P呢?
2楼2009-10-25 21:42:37
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lihaoexe

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-25 21:42:

楼主的意思是“两端引物一样”还是“引物两端一样”啊?同一个片段它的两端应该是不一样的吧,怎么能用相同的引物P呢?

是用相同引物,因为两边用连接酶连接了相同的片段
3楼2009-10-25 21:47:31
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2009-10-25 21:47:

是用相同引物,因为两边用连接酶连接了相同的片段

也就是说你再引物的互补序列外边又加了相同的序列,对吧?
4楼2009-10-25 22:37:14
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zier1011

木虫 (著名写手)

两条相同的引物,引物自己配对怎么办
花还香香的
5楼2009-10-26 15:48:51
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yaoyl0679

金虫 (正式写手)


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可以p出来的,没有问题,引物应该稍微长点,不然容易出现非特异扩增
6楼2009-10-26 15:53:54
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yxx41

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-25 22:37:

也就是说你再引物的互补序列外边又加了相同的序列,对吧?

原来是这个意思啊,那应该可以P出来,但是问题就是有可能primer dimer会比较严重吧,不过这是理论上的,你P下试试如何啊
内事不决问百度,外事不决问Google,横批:wikipedia
7楼2009-10-26 16:59:25
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

应该可以P出来的!
8楼2009-10-26 17:51:04
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jjlbest

木虫 (著名写手)

可以,没有问题的。
9楼2009-10-26 20:56:22
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smallcat227

木虫 (著名写手)


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应该可以吧,虽然二聚体可能比较严重,实践一下吧
10楼2009-10-27 10:34:19
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