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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zhangkun8005

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】 关于摸条件

求助:
请问植化高手,第一次装硅胶柱前具体怎么摸条件啊?在展开槽的展开剂怎么选择,点样的话怎么样的点的展开剂装柱子效果好呢?还有那些展开系统是不是有些是固定搭配的?

[ Last edited by zhangkun8005 on 2009-10-25 at 21:50 ]
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buffaloli

荣誉版主 (知名作家)


zhangkun8005(金币+1):谢谢参与
2.2装柱

首先选好柱子,根据层析的基质和分离目的而定。对于常用的来说一般柱子的直径与长度比为1:10即可。对于具体来说应该是粗长的柱子最好。柱子长了,相应的塔板数就高。分离效果好,柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。而且柱子粗一点洗脱剂的速度就很快,这样就减少了过柱时间。

一般装柱有干法或湿法装柱,干法就是直接将硅胶到入柱子中,然后加压或抽下真空排除气泡。湿法装柱是最常用的装柱方法,就是用洗脱剂中极性小的那种溶剂首先和硅胶混合搅拌均匀,最好充分吸附后,边搅拌边上柱。硅胶的用量一般是所需分离样品的用量的15到20倍。湿法装柱柱子不能干掉,否则影响分离效果。

     柱子装的质量好与差,是柱层析法能否成功分离纯化物质的关键步骤之一。一般要求柱子装的要均匀,不能分层,柱子中不能有气泡等。否则要重新装柱。
13楼2009-10-26 17:43:02
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lihuoyun666

金虫 (小有名气)


zhangkun8005(金币+1):谢谢参与
看你是那什么提的,再看看有没有文献可以参考了,一般你有什么提的你会大概知道他的极性是吧。那就试吧,不要想条件是你想出来的,你只要一试就有参考了,大了调小来,小了调大来,不要不敢试。
记得第一次师姐叫我摸个条件,我也是不知道怎么下手,其实一试就知道了
2楼2009-10-25 22:25:12
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kaikaifeng

荣誉版主 (文坛精英)

学术纯属狗屁~


zhangkun8005(金币+1):谢谢参与
摸条件就是综合考虑成点性,Rf值,分离度一些方面~
一般就那几种溶剂~
PE,环己烷,乙乙,氯仿,丙酮,甲醇,大的跟小的配合~
大不了加酸加碱什么的~
至于柱子,点板Rf在0.2-0.3就能洗下来~
不扯淡,不忽悠,不懂不要装懂;不折腾,不闹腾,睁眼不说瞎话;凭良心做人,以品德服人。
3楼2009-10-25 22:30:34
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yzhsp

木虫 (小有名气)


zhangkun8005(金币+1):谢谢参与
我师兄些给我说了些一般规律,然后自己摸时。Rf值在0.2左右。看点。。氯甲的话最好极性比你摸到的条件大一点。。杂点多就把极性调小的。。再在分的过程中去加大极性就行了。。。
4楼2009-10-25 22:37:59
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