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zhangkun8005

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】关于摸条件

求助：
请问植化高手，第一次装硅胶柱前具体怎么摸条件啊？在展开槽的展开剂怎么选择，点样的话怎么样的点的展开剂装柱子效果好呢?还有那些展开系统是不是有些是固定搭配的？

[ Last edited by zhangkun8005 on 2009-10-25 at 21:50 ]

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1楼 2009-10-25 21:32:58

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buffaloli

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zhangkun8005(金币+1):谢谢参与

2.2装柱

首先选好柱子，根据层析的基质和分离目的而定。对于常用的来说一般柱子的直径与长度比为1:10即可。对于具体来说应该是粗长的柱子最好。柱子长了，相应的塔板数就高。分离效果好，柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。而且柱子粗一点洗脱剂的速度就很快，这样就减少了过柱时间。

一般装柱有干法或湿法装柱，干法就是直接将硅胶到入柱子中，然后加压或抽下真空排除气泡。湿法装柱是最常用的装柱方法，就是用洗脱剂中极性小的那种溶剂首先和硅胶混合搅拌均匀，最好充分吸附后，边搅拌边上柱。硅胶的用量一般是所需分离样品的用量的15到20倍。湿法装柱柱子不能干掉，否则影响分离效果。

柱子装的质量好与差，是柱层析法能否成功分离纯化物质的关键步骤之一。一般要求柱子装的要均匀，不能分层，柱子中不能有气泡等。否则要重新装柱。