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kinkinkin新虫 (小有名气)
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[求助]
一个变黑普氏菌培养的问题已有1人参与
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| 请教一下各位，最近实验室买了一株变黑普氏菌，该菌需要TSA加羊血厌氧，现在是扩培出来了，我想请教一下保种和扩培是混匀羊血再继续，还是不管下层的羊血只是取上层液保种或者继续扩培，然后我后面想做液体抑菌测它的OD值，也是混匀后测还是只测不含羊血上层液的OD值呢，谢谢 |
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czyzsu
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变黑普氏菌的保种和扩培处理 在处理变黑普氏菌的保种和扩培时，您应该考虑菌株与羊血的相互作用。通常，厌氧菌在含有羊血的培养基中生长时，会消耗血中的氧气并可能与其他成分发生反应。在扩培过程中，如果直接混匀羊血，可能会导致菌株的不均一生长或引入不必要的变量。因此，建议在保种和扩培时采取以下步骤： 保种处理：在进行菌种保藏时，您应该小心地从含有羊血的培养基中取出菌落，以避免取走过多的羊血。可以使用接种环或接种针轻轻触碰菌落表面，然后将菌落转移到新鲜的无血培养基上。这样可以确保菌株的纯净性和活力，同时减少羊血对保藏过程的潜在影响。 扩培处理：在扩培时，您可以选择将含有羊血的培养基轻轻混匀，以确保菌株能够接触到足够的营养物质。然而，如果您担心羊血可能会影响菌株的生长或检测，可以在菌株适应新培养基后，通过离心或过滤的方式去除上层的羊血，然后使用不含羊血的培养基进行进一步的扩培。 OD值的测定 关于液体抑菌测试中OD值的测定，如果您的目的是评估菌株的生长抑制效果，建议在测试时使用不含羊血的培养基。这样可以确保OD值的测定不受羊血组分的干扰，从而提供更准确的菌株生长抑制数据。在进行测试之前，确保菌株在不含羊血的培养基中达到对数生长期，以便进行有效的OD值测定。 综上所述，您在保种和扩培时应优先考虑菌株的纯净性和活力，而在液体抑菌测试中则应使用不含羊血的培养基以获得准确的OD值。 深入研究 如何正确保存变黑普氏菌以保持其特性？ 变黑普氏菌的特性保持方法 变黑普氏菌（Pseudomonas putida）是一种革兰氏阴性、好氧的土壤细菌，具有多种工业应用，如降解污染物和生产生物塑料等。为了保持其特性，正确的保存方法尤为重要。以下是一些推荐的保存方法： 低温保存法：将变黑普氏菌接种在适宜的斜面培养基上，培养至适宜阶段后，置于4℃左右的冰箱中保藏。每隔一定时间（保藏期）再转接至新的斜面培养基上，生长后继续保藏，这样可以保持菌种的活性和遗传稳定性。 液体石蜡保存法：在无菌条件下，将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面上，石蜡油层高出斜面顶端1cm，使培养物与空气隔绝，加胶塞并用固体石蜡封口后，垂直放在室温或4℃冰箱内保藏。这种方法适用于多种微生物，包括变黑普氏菌，可以使保藏期达1～2年，或更长。 甘油悬液保藏法：将菌种悬浮在甘油蒸馏水中，置于低温下保藏，本法较简便，但需置备低温冰箱。保藏温度若采用-20℃，保藏期约为0.5～1年，而采用-70℃，保藏期可达10年。 冷冻干燥保存法：将菌种与保护剂混合均匀后，快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分，结合低温、干燥、除氧三重保护，可以实现变黑普氏菌的长期保存。 在实施上述保存方法时，应确保所有操作在无菌条件下进行，以避免污染。此外，保存前后应对菌株进行适当的鉴定和特性测试，以确保其纯度和活性未受影响。 变黑普氏菌在没有羊血的培养基上能否正常生长？ 变黑普氏菌是否能在没有羊血的培养基上正常生长，这个问题的答案取决于该菌种对特定营养成分的依赖程度。羊血培养基通常用于提供特定的生长因子，如血红蛋白和维生素，这些因子对于某些需要血的细菌来说是必需的。如果变黑普氏菌属于这类细菌，那么在没有羊血的培养基上可能难以正常生长或生长速度会受到影响。 在搜索结果中，有关于不同微生物生长条件的信息，但并未直接提及变黑普氏菌的具体生长需求。因此，为了确定变黑普氏菌在无羊血培养基上的生长能力，可能需要查阅专业的微生物学资料或进行实验验证。如果变黑普氏菌不是严格依赖血红蛋白和维生素的细菌，它可能能够在营养丰富的非选择性培养基上生长，如营养琼脂或肉汤培养基。在缺乏具体信息的情况下，建议进行实验室培养测试以确定最佳的培养条件。 为什么要避免在液体抑菌测试中使用含有羊血的培养基？ 在液体抑菌测试中避免使用含有羊血的培养基的原因主要与其对测试结果的潜在影响有关。羊血可以作为某些微生物的营养来源，特别是对于那些需要血液成分作为生长因子的细菌，如某些链球菌和嗜血杆菌。这可能导致这些细菌在含有羊血的培养基中更容易生长，从而影响抑菌剂的有效性评估。此外，羊血中的成分可能与测试中使用的抗菌物质发生相互作用，改变抗菌物质的活性或稳定性，进而影响测试结果的准确性。 在进行液体抑菌测试时，通常需要使用能够模拟微生物自然生长环境的培养基，同时确保测试条件不会对抗菌物质的活性造成不必要的干扰。因此，选择不含羊血或其他可能影响测试结果的添加剂的培养基更为恰当，以便获得可靠和重现性好的测试数据。在特定情况下，如果测试目的是评估抗菌物质对特定需要血液生长因子的细菌的效力，可能会使用含有羊血的培养基，但这需要在实验设计中考虑其对结果的潜在影响，并进行适当的控制措施。 |
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