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全谱分析——探究小分子化合物的“大工具”
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样品中如此微小的小分子化合物，究竟是如何进行分析的？ 代谢物全谱分析，通过色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）技术鉴定样品中小分子化合物，从而达到对其进行定性定量分析的目的。利用超高效液相色谱质谱联用技术对物质分离和鉴定，结合质谱数据库信息注释和分类，精准定性，帮助我们从整体上了解样本的性质，详细的描述样本中的物质组成和含量等信息。 01 检测平台 02 技术流程 ①样品采集→②代谢物提取→③样本预处理→④样本检测→⑤软件定性定量 03 代谢物定性定量方法 （1）定性分析软件 使用Compound Discoverer 3.3 进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作，根据二级质谱信息利用Compound Discoverer分析质谱原始数据,匹配Thermo mzCloud,、Thermo mzValut、ChemSpider等数据库，获得代谢物定性及定量数据。 （2）代谢物定量计算方法 A.相对浓度：根据各样品中代谢物峰面积，计算代谢物在样品中相对浓度。计算公式：各物质相对浓度=内标浓度/内标峰面积*代谢物峰面积/样品取样量，单位：μg/mL。 B.相对百分比：根据各样品中代谢物峰面积，计算代谢物在样品中相对百分比。计算公式：各物质相对百分比=鉴定代谢物峰面积/代谢物总的峰面积*100%，单位：%。 04 技术特点 1. 较高的灵敏度、分辨率； 2. 较宽的动态范围； 3. 适合于生物样本中复杂代谢产物的检测和潜在标志物的鉴定。 05 应用方向 1. 表型和生理功能研究； 2. 中医理论研究； 3. 疾病病理研究； 4. 食品科学与营养学研究； 5. 临床诊断及治疗； 6. 畜牧与农林业研究； 7. 药物研究； 8. 环境毒理研究。 06 送样要求 1. 血清、血浆：100ul/sample;-80℃保存，干冰寄送;若发生溶血，建议重新采样。 2. 尿液：1 mL /sample;-80℃保存，干冰寄送。 3. 组织：200mg/sample;-80℃保存，干冰寄送。 4. 细胞：≥1×10/sample;-80℃保存，干冰寄送。 5. 脑脊液：400 ul /sample;-80℃保存，干冰寄送。 6. 粪便及肠道内容物：200mg/sample;-80℃保存，干冰寄送。 7. 植物样本：鲜样≥3g/sample，干样≥1g/sample。 8. 微生物样本：≥1×10/sample;-80℃保存。 9. 注：避免反复冻融 |
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