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全谱分析——探究小分子化合物的“大工具”
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样品中如此微小的小分子化合物,究竟是如何进行分析的? 代谢物全谱分析,通过色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)技术鉴定样品中小分子化合物,从而达到对其进行定性定量分析的目的。利用超高效液相色谱质谱联用技术对物质分离和鉴定,结合质谱数据库信息注释和分类,精准定性,帮助我们从整体上了解样本的性质,详细的描述样本中的物质组成和含量等信息。 01 检测平台 02 技术流程 ①样品采集→②代谢物提取→③样本预处理→④样本检测→⑤软件定性定量 03 代谢物定性定量方法 (1)定性分析软件 使用Compound Discoverer 3.3 进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作,根据二级质谱信息利用Compound Discoverer分析质谱原始数据,匹配Thermo mzCloud,、Thermo mzValut、ChemSpider等数据库,获得代谢物定性及定量数据。 (2)代谢物定量计算方法 A.相对浓度:根据各样品中代谢物峰面积,计算代谢物在样品中相对浓度。计算公式:各物质相对浓度=内标浓度/内标峰面积*代谢物峰面积/样品取样量,单位:μg/mL。 B.相对百分比:根据各样品中代谢物峰面积,计算代谢物在样品中相对百分比。计算公式:各物质相对百分比=鉴定代谢物峰面积/代谢物总的峰面积*100%,单位:%。 04 技术特点 1. 较高的灵敏度、分辨率; 2. 较宽的动态范围; 3. 适合于生物样本中复杂代谢产物的检测和潜在标志物的鉴定。 05 应用方向 1. 表型和生理功能研究; 2. 中医理论研究; 3. 疾病病理研究; 4. 食品科学与营养学研究; 5. 临床诊断及治疗; 6. 畜牧与农林业研究; 7. 药物研究; 8. 环境毒理研究。 06 送样要求 1. 血清、血浆:100ul/sample;-80℃保存,干冰寄送;若发生溶血,建议重新采样。 2. 尿液:1 mL /sample;-80℃保存,干冰寄送。 3. 组织:200mg/sample;-80℃保存,干冰寄送。 4. 细胞:≥1×10/sample;-80℃保存,干冰寄送。 5. 脑脊液:400 ul /sample;-80℃保存,干冰寄送。 6. 粪便及肠道内容物:200mg/sample;-80℃保存,干冰寄送。 7. 植物样本:鲜样≥3g/sample,干样≥1g/sample。 8. 微生物样本:≥1×10/sample;-80℃保存。 9. 注:避免反复冻融 |
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