24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 565  |  回复: 0

Sh毕合生物

捐助贵宾 (正式写手)


[交流] PCR电泳无条带原因

可能的原因及对应的解决方案如下:

酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA 聚合酶因保存或运输不当而失活,往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。

模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸,造成 DNA 脱嘌呤而影响 PCR 的结果。

变性温度是否准确:PCR 仪指示温度与实际温度是否相符,过高酶在前几个循环就迅速失活;过低则模板变性不彻底。

反应系统中污染了蛋白酶及核酸酶,应在未加 Taq 酶以前,将反应体系 95℃ 加热 5~10 分钟。

引物变质失效。人工合成的引物是否正确。是否纯化,或因储存条件不当而失活。

引物错误。利用 BLAST 检查引物特异性或重新设计引物。

DNA 凝胶电泳时加入阳性对照,确保不是 DNA 凝胶和 PCR 程序的问题。

毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Sh毕合生物 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见