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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DNA的提取流程真的不可控吗？
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cuican371

新虫 (初入文坛)

[交流] DNA的提取流程真的不可控吗？

我做植物DNA提取，以前提的都好好的，那时还是8、9月。现在条件和操作都没有改变，但是DNA提出来的量明显减少了，而且发黑褐色，电泳条带弥散，紫外比值不是低的很就是高的很（其实我们那台紫外也不稳定）。现在郁闷死了，找不到任何原因。老板又不让用试剂盒，说让练手……（我们实验室从来就没用过试剂盒）各位能不能帮我破解一下啊？
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1楼 2009-10-23 10:51:19
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zhy0790707

铜虫 (初入文坛)
★ ★
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1949stone(金币+1,VIP+0): 10-24 11:11
植物若用CTAB法提取，发现黑色'带散，若试剂没问题就 就是有杂质，仪器用品不干净
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2楼2009-10-23 12:16:03
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
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是不是提DNA的试剂出问题了？或者是你提DNA的原料出问题了？
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3楼2009-10-23 14:53:10
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cuican371

新虫 (初入文坛)
试剂是新配的，植物叶片以前提的都可以，只是最近不行了
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4楼2009-10-23 16:37:32
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 10-24 08:18
~~~DNA提取嘛，嗯嗯，试剂，容器，操作，都没问题的话，那就是材料的问题，你叶片怎么保存的..>？

提叶片的话，无非就是研磨、裂解、酚，氯仿，异戊醇等等这一套下来吧？这个过程应该没有什么可控不可控吧？
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5楼2009-10-23 17:30:36
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖
这很难说，有很多可变因素，我以前也遇到过这种情况
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6楼2009-10-23 20:32:04
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tsingtao2008

木虫 (著名写手)

地球村村民
★
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可能主要与DNA酶及其他代谢物有关
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钱要流动，人要走动
7楼2009-10-23 21:24:47
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gskekeai

木虫 (正式写手)
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amisking(金币+2,VIP+0): 10-24 08:18
提取DNA的材料是保存的材料还是鲜样？？如果是保存的材料是否保存的合适？鲜样的话是否已经变老，色素类的杂质变多而导致dna色黑？
如果紫外以相对可靠的话，说明你的提取结果不理想，总有蛋白或者是rna的污染。
dna条带弥散？如果是条带较亮的弥散试着调整一下浓度，浓度太大跑出的带也成弥散的拖尾状。
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8楼2009-10-23 21:37:40
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cuican371

新虫 (初入文坛)
我的材料是硅胶快速干燥的叶片，应该没有问题，因为前一段时间提的效果很好。试剂也是新配的。而且我们实验室不止我一个人的提取出现类似问题……郁闷
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9楼2009-10-23 23:09:04
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hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 10-25 18:33
我们这儿做的一些微生物实验，就经验来看，冬天的效果明显要好于夏天。现在实验室一般都没有温度恒定装置，实验过程中的一些温度变化可能会对实验结果产生影响。建议你关注下实验中的温度控制。另外，也有可能是你样品或者试剂有问题。
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10楼2009-10-24 00:21:37
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