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Ellman法测定乙酰胆碱酯酶的抑制活性
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我在用Ellman法测定化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性以及IC50，阳性对照是他克林，用的0.1M PH=8.0的磷酸盐缓冲液，AChE的终浓度为0.2 U/mL，底物和DTNB的浓度都为2 mM，测定412 nm处的吸光度，计算抑制率和IC50，发现阳性对照他克林的IC50比文献值大3个数量级。后来扫描了测定体系的紫外可见光谱，发现412 nm处并不是最大吸收，最大吸收在320-325 nm左右。已经做了好几遍了，要崩溃了，请问有没有做过的友友，求指导！万分感谢 发自小木虫Android客户端 |
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