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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教pMAL-c2e载体蛋白表达
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 请教pMAL-c2e载体蛋白表达

请教各位。谁用过pMAL-c2e载体在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达，具体步骤怎么样的？越详细越好！摇菌转速多少？IPTG浓度？不胜感激！
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
1楼 2009-10-22 15:47:33
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
我顶！
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
2楼2009-10-22 17:48:11
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
怎么没有人回答！其他质粒的，只要是IPTG诱导表达的也可以！
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
3楼2009-10-23 09:15:41
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konggy

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
Anson1358(金币+3,VIP+0):谢谢 10-23 10:28
转速250就差不多了，IPTG你可以尝试0.1mM-0.3mM,这个质粒说明说上应该有介绍，诱导时间要看诱导温度定，37度3个小时就差不多
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4楼2009-10-23 10:17:59
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子
★
louyiceng(金币+1,VIP+0): 12-6 15:52
请翻到分子克隆中文版（第三版）103页  上面说的非常详细。
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可以用QQ找我……
5楼2009-10-23 10:33:10
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
★
louyiceng(金币+1,VIP+0): 12-6 15:52
引用回帖:
Originally posted by 红多多 at 2009-10-23 10:33:
请翻到分子克隆中文版（第三版）103页  上面说的非常详细。

楼上的分子克隆第三版103页是用X-gal和IPTG筛选细菌菌落，我说的是IPTG诱导外源基因的表达，你没有理解我的意思！
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
6楼2009-10-23 11:03:28
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
Anson1358(金币+1,VIP+0):我也看到啦，谢谢 10-23 15:13
分子克隆中文版（第三版）下册1228页。诱导不同的蛋白情况不太一样，你可以诱导4小时，200rpm试试。
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7楼2009-10-23 15:04:43
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