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alfabeta

新虫 (小有名气)

[交流] DNA提取的问题

对于原核,如细菌,基因组包括环状的DNA,质粒DNA等,如果提取总DNA,电泳的话应该有好几条带才对啊。而对于真核,除了有很多条染色体,每条染色体对于一条DNA链,另外有些还有质粒,线粒体DNA,叶绿体DNA,如果提取总DNA,岂不是有很多条带,可正常情况,大部分都只有一条带,这是为什么?呵呵,因为是非生物专业的,问题有点...

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-22 at 15:48 ]
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提取的方法和用的试剂不同可使产物具有特定的形态,如提质粒的方法可去除基因组的DNA。
开始新的学习!
2楼2009-10-22 14:30:05
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有的时候提质粒操作不好的话也能把基因组提出来
3楼2009-10-22 14:46:43
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 10-22 18:57
引用回帖:
Originally posted by alfabeta at 2009-10-22 13:25:
对于原核,如细菌,基因组包括环状的DNA,质粒DNA等,如果提取总DNA,电泳的话应该有好几条带才对啊。而对于真核,除了有很多条染色体,每条染色体对于一条DNA链,另外有些还有质粒,线粒体DNA,叶绿体DNA,如果提 ...

提基因组DNA时,因为提取过程中很难避免一些剪切力及其他因素的影响,所以很难提取到只有1条或者几条DNA链的情况吧,因为基因组的很多地方被打断了,所以有时候是糊的一片吧!并且根据你提取方法的不同,提基因组时质粒的DNA可能不会提取到吧?
4楼2009-10-22 14:49:14
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priorpost06

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 10-22 18:57
提总DNA一般情况是一条带的,你要看DNA有多大,依照Marker的大小来定,一般细菌的总DNA都会大于15000kb,如果小于这个数值,则有可能是质粒DNA,当然也有少数质粒DNA大于以上数值,具体要参考提取的细菌或真菌的DNA大小。提质粒DNA的方法和细菌总DNA的方法还是有些出入的,小心细致操作,错误的可能性不大。
   有时候在提取的过程中可能会导致DNA链的断裂,导致多条带的出现,尽量要细致操作,其次RNaseA酶降解RNA也是必要的!
5楼2009-10-22 15:46:45
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jjlbest

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们提取的DNA 一般只有一条带是因为DNA基因组很大,通常是缠绕在一起的,所一只能看到一条带。
6楼2009-10-22 18:42:53
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superyuanjia

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
因为基因组dna和质粒dna的超级结构不同,提取的时候可以按照需要保留质粒或者基因组
7楼2009-10-22 20:22:38
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jinran

金虫 (初入文坛)

也许是DNA的分子量太大了,在凝胶中没有分散开。
8楼2009-10-23 09:04:49
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