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CAR-T细胞杀伤实验求助
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最近做了一个CAR-T细胞，然后做体外细胞杀伤实验验证其效果，CAR-T有杀伤效果，但是对照的T细胞组也出现了杀伤效果，两次实验都是这种结果，不知道问题出在哪里 实验流程是这样的： 第一天：从健康成年人采集血液，分离出PBMC，使用XVIVO15培养基（5%自体血清 +1000UI/mL 白介素2）培养到第二天 第二天：将培养的PBMC平分成两份，分别加入与细胞数量相等的CD3/CD28磁珠（gibco），继续培养到第三天 第三天：一分PBMC加入含car的慢病毒，moi为8，polybrene 8μg/mL，另一份PBMC不加任何东西，都放在离心机中 2000g 32℃ 离心2小时，离心结束后直接放回培养箱 第四天：将两份细胞吹匀或使用刮刀，分别收集后离心，然后重新使用XVIVO15重悬，继续培养 第五六天：根据培养基消耗状态，补充培养基 第七天：除去细胞中的CD3/CD28磁珠，继续培养 第八天：收集足够的T细胞和CAR-T细胞用于细胞杀伤实验（RTCA法） 我个人感觉问题出在去除CD3/CD28磁珠到细胞杀伤实验的时间太短，磁珠加强了T细胞的非特异杀伤 |
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