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汕头大学海洋科学接受调剂
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夏末

铜虫 (小有名气)

[交流] SDS电泳的电压电流问题

SDS—PAGE电泳,跑的是蛋白,使用六一的DYY-6C型电泳仪,参数设定为最大电压150V,最大电流40mA。
电极缓冲液1gSDS,6gTris,28.8g甘氨酸,定容1000mL

现在的问题是:
如果恒流40mA则电压在47v左右上不去
如果想提高电压到100v则得把电流设定到90mA左右,气泡简直排山倒海,这样跑出来会不会有问题?
另外有人有电泳仪的说明书吗,是不是我设定的参数不对?因为跑电泳的时候电流符合最大电流的设定,并且最大电流的I一直在闪,我想是不是可以让最大电压的U闪,以最大电压为准呢?

[ Last edited by 夏末 on 2009-10-21 at 13:56 ]
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爱国爱家爱实验 看雨看雪看文献
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
夏末(金币+1,VIP+0):也考虑过,但是要电压达到100v,电流至少90mA,会不会太大? 10-21 09:16
夏末(金币+1,VIP+0):谢谢 10-23 12:26
开始跑后,如果显示稳流,将电流向上调,升到一定程度,就稳压了。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-10-21 09:11:10
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夏末

铜虫 (小有名气)

也考虑过这个问题,但是如果要电压达到100v,电流至少要调到90mA,会不会太大啊,有没有问题?
爱国爱家爱实验 看雨看雪看文献
3楼2009-10-21 09:15:29
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

★ ★
夏末(金币+1,VIP+0):谢谢 10-21 13:44
夏末(金币+1,VIP+0):说得很详细 10-23 12:26
电压与电流是有制约的 一方恒定时 另一方面就有个最大值 所以会出现电压调不上去的情况 可以把电流值往大调一下 再调电压
海纳百川止于至善
4楼2009-10-21 09:22:22
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★ ★
夏末(金币+2,VIP+0):很感谢 10-21 13:44
夏末(金币+1,VIP+0):已经试过了,虽然还是不好用,但是仍然非常感谢 10-23 12:28
电泳缓冲液应该要调pH值的,用这个配方看看。
10 x 蛋白质电泳缓冲液(pH 8.3):Tris  30.2 g,甘氨酸188 g, SDS 10 g,溶于蒸馏水,并定溶至1 L。电泳时用0.5x
Thank-you,so-blue.
5楼2009-10-21 09:28:23
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bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
夏末(金币+2,VIP+0):感谢,我试试 10-21 10:58
夏末(金币+1,VIP+0):非常详细,追加一个,感谢 10-23 12:28
amisking(金币+2,VIP+0): 10-23 13:16
你应该知道这个厂的电泳仪,一般是你要跑恒流,就把电流调到你要的比如40mA,把电压调到比相应电压高,照你的情况,至少要高于100,或者直接调到最高,这样就是恒流

要是恒压,同上,把电压电流颠倒就是

另外有时候电流小,你检查下缓冲液有没有没过胶面,要是液面太低就会电阻很大,电流很小了

应该很全面了吧
6楼2009-10-21 10:34:31
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夏末

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by bioxixi at 2009-10-21 10:34:
你应该知道这个厂的电泳仪,一般是你要跑恒流,就把电流调到你要的比如40mA,把电压调到比相应电压高,照你的情况,至少要高于100,或者直接调到最高,这样就是恒流

要是恒压,同上,把电压电流颠倒就是

另 ...

我确实不太会使用这个电泳仪,这么说我要是要跑恒压100v的话,就把电压设定到100v,电流设定到比相应电流高,那恐怕要到100mA了啊,这么大的电流能行吗?
爱国爱家爱实验 看雨看雪看文献
7楼2009-10-21 10:52:44
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bioxixi

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 夏末 at 2009-10-21 10:52:


我确实不太会使用这个电泳仪,这么说我要是要跑恒压100v的话,就把电压设定到100v,电流设定到比相应电流高,那恐怕要到100mA了啊,这么大的电流能行吗?

你把电流设100,实际是不会到一百的,会显示实际电流大约十几毫安的样子吧,你看了说明书就知道了,它是这样来设的
我之前也是不清楚,不得不坐下来把说明书从头到尾看了一遍,呵呵 以后就会用了,不是像以前那样控制不了恒压还是恒流
8楼2009-10-23 12:52:07
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star1987

木虫 (著名写手)

笑傲江湖


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也遇到过这种情况,我一般把电压调到80v左右,而且实验过程中电压很不稳定,你应该过一段时间调一次
9楼2009-10-23 13:14:39
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夏末

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by star1987 at 2009-10-23 13:14:
我也遇到过这种情况,我一般把电压调到80v左右,而且实验过程中电压很不稳定,你应该过一段时间调一次

我的电压倒是很稳定,就一直和电流的数值差不多,比电流数值稍高一点点,那你调到80v是不是电流也有那么大呢,那样跑出来没有影响吗?
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10楼2009-10-24 09:18:52
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