| 查看: 612 | 回复: 8 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yaoyogjian金虫 (初入文坛)
三军统帅
|
[交流]
怎样防止酶失活？【截止时间 2009年10月30日】
|
||
|
请教各位前辈： 本人是做生物燃料电池方向的，在葡萄糖氧化酶和介体溶液中为什么一加入葡萄糖溶液，葡萄糖氧化酶就沉沉变性了呢？ 我尝试着改变酶溶液或者介体的浓度 溶液PH值以及葡萄糖的浓度 怎么都没有效果？ 怎样防止葡萄糖氧化酶在葡萄糖和介体溶液中变性呢？ 敬请诸位指点迷津 谢谢！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料专硕英一数二306
已经有5人回复
-
085600材料与化工调剂 324分
已经有9人回复
-
0703化学调剂
已经有12人回复
-
0703化学 305求调剂
已经有4人回复
-
0703化学调剂，求各位老师收留
已经有10人回复
-
271材料工程求调剂
已经有5人回复
-
281求调剂（0805）
已经有16人回复
-
304求调剂
已经有6人回复
-
材料工程专硕调剂
已经有6人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有4人回复
kobe3
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 363.5
- 帖子: 34
- 在线: 3.7小时
- 虫号: 865589
- 注册: 2009-10-08
- 性别: GG
- 专业: 高分子材料的加工与成型
3楼2009-10-20 21:15:04
huangxinqi
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 505.8
- 散金: 16
- 帖子: 470
- 在线: 47.3小时
- 虫号: 863880
- 注册: 2009-10-06
- 专业: 食品科学基础
2楼2009-10-20 21:02:25
dingqian03
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 633
- 红花: 1
- 沙发: 1
- 帖子: 277
- 在线: 14.6小时
- 虫号: 851093
- 注册: 2009-09-18
- 性别: GG
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
★ ★ ★ ★
yaoyogjian(金币+4,VIP+0):谢谢啦 不过这些可能不是我试验中酶失活的因素 有没有可能是正负电荷相吸的缘故呢？ 10-20 22:51
yaoyogjian(金币+4,VIP+0):谢谢啦 不过这些可能不是我试验中酶失活的因素 有没有可能是正负电荷相吸的缘故呢？ 10-20 22:51
|
酶失活无非是温度，PH，紫外线等方面，你看看下面对你有帮助没 简单的说，由于酶大多是蛋白质，一般来讲在高温、强酸、强碱、紫外线等环境下会发生变性 影响酶活力的因素 米契里斯（Michaelis）和门坦（Menten）根据中间产物学说推导出酶促反应速度方程式，即米-门公式（具体参考《环境工程微生物学》第四章微生物的生理）。由米门公式可知：酶促反应速度受酶浓度和底物浓度的影响，也受温度、pH、激活剂和抑制剂的影响。 （1）酶浓度对酶促反应速度的影响 从米门公式和酶浓度与酶促反应速度的关系图解可以看出：酶促反应速度与酶分子的浓度成正比。当底物分子浓度足够时，酶分子越多，底物转化的速度越快。但事实上，当酶浓度很高时，并不保持这种关系，曲线逐渐趋向平缓。根据分析，这可能是高浓度的底物夹带夹带有许多的抑制剂所致。 （2）底物浓度对酶促反应速度的影响 在生化反应中，若酶的浓度为定值，底物的起始浓度较低时，酶促反应速度与底物浓度成正比，即随底物浓度的增加而增加。当所有的酶与底物结合生成中间产物后，即使在增加底物浓度，中间产物浓度也不会增加，酶促反应速度也不增加。 还可以得出，在底物浓度相同条件下，酶促反应速度与酶的初始浓度成正比。酶的初始浓度大，其酶促反应速度就大。 在实际测定中，即使酶浓度足够高，随底物浓度的升高，酶促反应速度并没有因此增加，甚至受到抑制。其原因是：高浓度底物降低了水的有效浓度，降低了分子扩散性，从而降低了酶促反应速度。过量的底物聚集在酶分子上，生成无活性的中间产物，不能释放出酶分子，从而也会降低反应速度。 （3）温度对酶促反应速度的影响 各种酶在最适温度范围内，酶活性最强，酶促反应速度最大。在适宜的温度范围内，温度每升高10℃，酶促反应速度可以相应提高1～2倍。不同生物体内酶的最适温度不同。如，动物组织中各种酶的最适温度为37～40℃；微生物体内各种酶的最适温度为25～60℃，但也有例外，如黑曲糖化酶的最适温度为62～64℃；巨大芽孢杆菌、短乳酸杆菌、产气杆菌等体内的葡萄糖异构酶的最适温度为80℃；枯草杆菌的液化型淀粉酶的最适温度为85～94℃。可见，一些芽孢杆菌的酶的热稳定性较高。过高或过低的温度都会降低酶的催化效率，即降低酶促反应速度。 最适温度在60℃以下的酶，当温度达到60～80℃时，大部分酶被破坏，发生不可逆变性；当温度接近100℃时，酶的催化作用完全丧失。 （4）pH对酶促反应速度的影响 酶在最适pH范围内表现出活性，大于或小于最适pH，都会降低酶活性。主要表现在两个方面：①改变底物分子和酶分子的带电状态，从而影响酶和底物的结合；②过高或过低的pH都会影响酶的稳定性，进而使酶遭受不可逆破坏。 （5）激活剂对酶促反应速度的影响 能激活酶的物质称为酶的激活剂。激活剂种类很多，有①无机阳离子，如钠离子、钾离子、铜离子、钙离子等；②无机阴离子，如氯离子、溴离子、碘离子、硫酸盐离子磷酸盐离子等；③有机化合物，如维生素C、半胱氨酸、还原性谷胱甘肽等。许多酶只有当某一种适当的激活剂存在时，才表现出催化活性或强化其催化活性，这称为对酶的激活作用。而有些酶被合成后呈现无活性状态，这种酶称为酶原。它必须经过适当的激活剂激活后才具活性。 （6）抑制剂对酶促反应速度的影响 能减弱、抑制甚至破坏酶活性的物质称为酶的抑制剂。它可降低酶促反应速度。酶的抑制剂有重金属离子、一氧化碳、硫化氢、氢氰酸、氟化物、碘化乙酸、生物碱、染料、对-氯汞苯甲酸、二异丙基氟磷酸、乙二胺四乙酸、表面活性剂等。 对酶促反应的抑制可分为竞争性抑制和非竞争性抑制。与底物结构类似的物质争先与酶的活性中心结合，从而降低酶促反应速度，这种作用称为竞争性抑制。竞争性抑制是可逆性抑制，通过增加底物浓度最终可解除抑制，恢复酶的活性。与底物结构类似的物质称为竞争性抑制剂。抑制剂与酶活性中心以外的位点结合后，底物仍可与酶活性中心结合，但酶不显示活性，这种作用称为非竞争性抑制。非竞争性抑制是不可逆的，增加底物浓度并不能解除对酶活性的抑制。与酶活性中心以外的位点结合的抑制剂，称为非竞争性抑制剂。 有的物质既可作为一种酶的抑制剂，又可作为另一种酶的激活剂。 |
4楼2009-10-20 21:30:20
wg0376
木虫 (正式写手)
伯纳乌王子
- 应助: 68 (初中生)
- 金币: 3288
- 散金: 23
- 帖子: 315
- 在线: 92.4小时
- 虫号: 867478
- 注册: 2009-10-10
- 性别: GG
- 专业: 有机分子功能材料化学
5楼2009-10-20 21:47:57
