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fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 用自备的引物测序没有信号是什么原因?

用我检测的引物去测序没有信号时怎么回事?

[ Last edited by amisking on 2009-10-20 at 21:20 ]
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1,VIP+0):感谢交流 我也遇到过 只是引物降解 说服不了我啊 PCR产物降解也不太可能 感觉有的公司是在推诿 10-20 17:38
可能引物或者PCR在运输过程中降解了,我也遇到过这种情况。换新的就好了
2楼2009-10-20 16:47:35
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paulajjh

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很多原因的。你跟测序的公司多交流。如果可以,就用通用引物好了
3楼2009-10-20 16:54:27
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

样品假阳性吧 比如质粒没有转进去
4楼2009-10-20 20:46:57
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changes

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2009-10-20 20:46:
样品假阳性吧 比如质粒没有转进去

赞同,很有可能。检测时是菌液PCR还是其它?不知酶切检测的有吗?
5楼2009-10-20 21:26:05
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物跟样品都有可能有问题。
6楼2009-10-20 22:25:48
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fykxy_206

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
推诿完全有可能,你就在给他一次,反正没有信号又不收你钱,还浪费他邮费。呵呵  是不是太坏了?
7楼2009-10-21 10:07:20
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红多多

木虫 (正式写手)

版筑饭牛的日子


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如果测序用的是你转换的细菌,提取质粒然后做酶切,检查是否片段连接出问题。
如果电泳检测后发现有片段,可回收片段再次用你的引物扩增进行核实。
可以用QQ找我……
8楼2009-10-21 10:20:27
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苹果男

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个情况碰到过,感觉用于测序的引物要求很高,用通用引物测序是不错的,但是用自己的检测引物就没有信号,但有时候是没有通用引物可用的,个人觉得是自己的检测引物的问题
9楼2009-10-21 13:40:36
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Entrez1110


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物是正向的吧,如果是反向引物,你要和公司说明一下。
可以用通用引物测嘛!
10楼2009-10-21 14:52:18
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