| 查看: 680 | 回复: 0 | |||
[交流]
DNA提取常见问题
|
|
DNA提取常见问题 DNA提取，是科研实验室常用的实验步骤，提取DNA的质量直接影响后续的检测工作，今天小助手将常见的问题进行了一个总结，供大家参考。 一、A260/280比值较低？或者A260/280比值较高？ 用水作为洗脱液比较偏低，或者蛋白质残留，但如果操作过程中使用了苯酚，则更可能是苯酚残留。而比较高可能是大量RNA残留，没有使用RNaseA，或RNaseA活性下降。 A260值提示的含量与电泳检测时提示的含量有可见的误差则为苯酚残留。 二、提取的细菌基因组DNA有降解，为什么？ 三、提取的基因组DNA生物活性差，为什么？ 提取的基因组DNA中盐分浓度过高，请严格按照说明书操作。 提取的基因组DNA中含有乙醇。离心的速度和时间应该严格遵循说明书要求进行。 四、为什么用酚与氯仿抽提DNA时，还要加少量的异戊醇？ 在抽提DNA时，为了混合均匀，必须剧烈振荡容器数次，这时在混合液内易产生气泡，气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊醇为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1（不必先配制，可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿与异戊醇即成），同时异戊醇有助于分相，使离心后的上层水相，中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎211本科同学，过A区国家线，A区非偏远一本，交叉学科课题组
已经有24人回复
-
新疆大学地质与矿业工程学院招生
已经有10人回复
-
招调剂
已经有11人回复
-
0856材料与化工求调剂！
已经有11人回复
-
材料与化工304求调剂
已经有10人回复
-
A区一本交叉课题组，低分调剂，招收机械电子信息通信等交叉方向
已经有31人回复
-
中科大材料299求调剂
已经有7人回复
-
301求调剂
已经有3人回复
-
材料考研339求调剂
已经有3人回复
-
材料专硕290求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
5