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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有没有会做链霉菌接合转移的前辈们请进
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七七七原

新虫 (小有名气)

[求助] 有没有会做链霉菌接合转移的前辈们请进

最近在做链霉菌的接合转移，已经做到覆药步骤了，用萘啶酮酸和安普覆药之后只能见到几个小小的菌落，也不知道是不是链霉菌，挑了这些单菌落到平板上纯化的时候长出来的好像都是大肠杆菌，请问这样该怎么办，前面的步骤需要进行什么调整吗

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1楼 2024-03-17 18:06:49
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七七七原

新虫 (小有名气)
再补充一下，覆药之后会整个平板都长白白的一层，好像是大肠杆菌，挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去，这样该怎么办

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2楼2024-03-17 18:11:09
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gpm123456

新虫 (初入文坛)
我做过这个实验，可以给你分析一下，你具体是什么链霉菌？载体用的是pSET152？？
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3楼2024-03-20 11:28:26
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七七七原

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gpm123456 at 2024-03-20 11:28:26
我做过这个实验，可以给你分析一下，你具体是什么链霉菌？载体用的是pSET152？？

谢谢！质粒是pib139

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4楼2024-03-20 15:39:22
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七七七原

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gpm123456 at 2024-03-20 11:28:26
我做过这个实验，可以给你分析一下，你具体是什么链霉菌？载体用的是pSET152？？

质粒是pib139，很多文献也用这个做出来了，是白色链霉菌

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5楼2024-03-20 15:40:24
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linzuduan

铁虫 (小有名气)
链霉菌的菌落形态环视非常明显的，前期是跟细菌有点像。
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微生物发酵工程、生物合成
6楼2024-04-08 09:28:13
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quanchong

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 七七七原 at 2024-03-17 18:11:09
再补充一下，覆药之后会整个平板都长白白的一层，好像是大肠杆菌，挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去，这样该怎么办

如果萘啶酮酸应用合适，理论上不会再生长大肠，怀疑是杂菌污染，我也碰到过，控制好无菌操作再做一次；接合子数量少的话可以增加下大肠供体菌和孢子用量，有的人会探究两者比例已达到最佳接合效率。我的经验是模式链霉菌都很好做接合转移。
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7楼2024-04-12 19:08:38
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gpm123456

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 七七七原 at 2024-03-17 18:11:09
再补充一下，覆药之后会整个平板都长白白的一层，好像是大肠杆菌，挑取链霉菌的时候也会把大肠挑进去，这样该怎么办

具体步骤我看一下，给你找找原因
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8楼2024-05-06 13:51:53
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