| 查看: 1067 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
andia木虫 (著名写手)
|
[交流]
鲑鱼精DNA处理
|
||
| 有没有哪位大侠了解粉末的鲑鱼精DNA怎么处理？ |
回复此楼» 猜你喜欢
评审有感
已经有16人回复
-
献血感触
已经有3人回复
-
反应很差，大量原料没有反应
已经有3人回复
-
Sci. Bull. 悲剧经验
已经有4人回复
-
找博士生导师
已经有7人回复
-
上海大学实验技术岗位非升即走
已经有11人回复
-
26/27申博自荐-锂/钠电池方向
已经有4人回复
-
同样的基金本子，换个专家直接从C变A！
已经有3人回复
-
别被青基扩招骗了！26年科研内卷才刚刚开始
已经有4人回复
-
26/27博士推荐
已经有4人回复
your2007
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 22507.1
- 红花: 8
- 帖子: 2517
- 在线: 324.4小时
- 虫号: 710330
- 注册: 2009-02-27
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2009-10-18 09:20:37
andia
木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 7831.9
- 散金: 7838
- 红花: 8
- 帖子: 1963
- 在线: 96.9小时
- 虫号: 446067
- 注册: 2007-10-28
- 性别: MM
- 专业: 实验动物学
3楼2009-10-18 09:22:22
your2007
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 22507.1
- 红花: 8
- 帖子: 2517
- 在线: 324.4小时
- 虫号: 710330
- 注册: 2009-02-27
- 专业: 微生物遗传育种学
4楼2009-10-18 09:55:15
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
|
我最近也想用氯化锂的方法做转化，但是不知道鲑鱼精DNA要怎么处理，看到网页上有一种处理方法，也不是很明白，想请教你一下。 鲑鱼精DNA 说明：生化研究。 CAS＃：9007-49-2 外观：白色线状 特性：Linkage：Formerly listed as Type III 溶解性：溶于水，参考浓度2mg/ml 储存条件：2-8℃ From Sigma D1626 Salmon DNA 的配制： 组份浓度10 mg/ml Salmon DNA ;配制量约100 ml 配制方法: 1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中，加入约200 ml的TE Buffer。 2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时，溶解后加入4 ml的5 M NaCl， 使其终浓度为0.1 M。 3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。4. 回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20 次，以切断DNA。 5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。 6. 离心回收DNA后，溶解于100 ml的去离子水中，测定溶液的OD260值。 7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。 8. 煮沸10分钟后，分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。 9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后，迅速冰浴冷却。 第3步中苯酚和氯仿的用量是多少啊，我查了很久，都没找到。 还有第五步中的乙醇用的是无水乙醇吗？ 请做过这个实验的大侠指点一下。 |
5楼2010-03-23 09:14:16
5