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yangjunzhong

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】海藻酸钠固定化微生物方法

我将反硝化细菌的培养液, 在3000rpm下离心15min,用pH7.4的磷酸盐缓冲液洗涤并离心2次,然后将所得的浓缩菌体按一定比例与2%的海藻酸钠溶液混合均匀,用注射器滴入4%CaCl2溶液中,4℃钙化18h,形成直径约为3mm的小球,用生理盐水和水冲洗干净。在SC培养基中测反硝化值,30℃,100rpm/min培养。但在6h小球就溶解了。用4%的海藻酸钠6h也溶解。不知道什么原因,请各位帮忙!
【SC(g/L):NaNO3 0.85,丁二酸钠 4.72;Casamino Acid 5.0,Na2HPO4  7.9,KH2PO4 1.5,MgSO4·7H2O 0.10,微量元素2.0。最后调pH至7.2】
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1、钙化时间不用那么长,另外钙化后,换新鲜的氯化钙再处理半小时试试。
2、海藻酸钙的抗微生物分解能力还是较差的,你多查查你的反硝化细菌对海藻酸钙的分解能力是什么样的,实在不行,换其他抗生物分解能力强的固定化材料试试,如:聚乙烯醇、聚丙烯酰胺。
3、培养的过程中,对你的培养基中的PH值进行检测看看,看pH值变化情况是什么样的,看是否有产酸反应。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-10-18 16:05:28
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


SC液的问题,会螯合ca
3楼2009-10-18 19:46:28
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