| 查看: 714 | 回复: 0 | |||
[交流]
ELISA试剂盒实验的优缺点
|
|
ELISA试剂盒价格是通过酶联免疫吸附反应进行实验，来检测特定物质的试剂盒。试剂盒中会有不同浓度的标准样品，在酶标条中通过固相的抗原或抗体，酶标记的抗原或抗体，酶作用的底物反应。可形成标准曲线从而进行试验样品的测定。检测不同的物质有对应不同的试剂盒。 ELISA试剂盒实验的优缺点： 优点：操作方便，实验可靠 缺点：1只是诊断的辅助手段，特异性和灵敏性有待提高。 2操作过程有些繁琐，反应血药时间，不能一蹴而就。 相信经常用elisa试剂盒做实验的人都知道，有四种常用的方法来检测，他们分别是直接法、间接法、双抗体夹心法和竞争法。今天给大家分享下他们的优点和缺点。 1.直接法（direct ELISA） 将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。 优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。 缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。 2.间接法（indirect ELISA） 此测定方法与直接法类似，差别在于一级抗体没有酶标记，改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。 优势：二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它*多的免疫反应性。 缺点：交互反应发生的机率较高。 3.双抗体夹心法（sandwich ELISA） 被检测的抗原包被在两个抗体之间，其中一个抗体将抗原固定于固相载体上，即捕捉抗体。另一个则是检测抗体，此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量；或不标记，再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。 优势：高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。 缺点：抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。 4.竞争法（competitive ELISA） 样本里的抗原（自由抗原）和纯化并固定在固相载体上的抗原（固定抗原）一起竞争相同的抗体，当样品里的自由抗原越多，就可以结合越多的抗体，而固定抗原就只能结合到较少的抗体，反之亦然。经清洗步骤，洗去自由抗原和抗体的复合物，只留下固定抗原和抗体的复合物，拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较，根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。 优势：可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。 缺点：整体的敏感性和专一性都较差。 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
回复此楼» 猜你喜欢
085701环境工程专硕求调剂
已经有6人回复
-
0817化学工程319求调剂
已经有10人回复
-
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有5人回复
-
274求调剂0856材料化工
已经有10人回复
-
337一志愿华南理工0805材料求调剂
已经有6人回复
-
（081700）化学工程与技术-298分求调剂
已经有7人回复
-
材料与化工304求B区调剂
已经有5人回复
-
NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗
已经有9人回复
-
一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂
已经有17人回复
-
0703化学一志愿211 总分320求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
