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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】液相 上样前该如何冲柱子？
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zhaoguohua

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】液相 上样前该如何冲柱子？

求助：我做的液相是梯度洗脱，上样前是否一定要用100%甲醇或乙腈冲柱子，之后再用初始流动相平衡柱子，然后才能上样，原因是什么？
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1楼 2009-10-15 11:06:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xl8105

★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-15 15:35
反相的话
先用百分之百甲醇冲将其中物质全部冲出
再用百分之八十五甲醇冲，平衡柱子
最后在进样之前再用你所配置的流动相起始浓度冲至基线平稳
在进行梯度进样
若要使用含盐浓度较高的流动相，使用前请用有机溶剂含量较低的溶剂如10-50%的甲醇或乙腈水溶液顶替原来的评价流动相。
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6楼2009-10-15 14:08:58
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)
★
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-15 15:34
100%冲是为了怕有一部分难洗脱物质残留在柱子里

进样前一定用起始流动相稳定一段时间，否则，柱子里面的流动相可能没有完全置换成起始流动相，影响出峰的
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2009-10-15 11:12:31
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petunia06

金虫 (小有名气)
★
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O(∩_∩)O哈哈~不愧是akosrios！讲解的很到位吗！
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3楼2009-10-15 11:23:19
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温炎

银虫 (正式写手)
★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-15 15:35
不会吧!我们只有在换柱时,长时间没人使用时还有在使用缓冲液后,才会用到100%甲醇.
      梯度洗脱前没有用过纯的有机相去洗柱,,并根据前一次的流动相对平衡时间进行变动,好像对结果没有发现有什么大的影响呀!
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人要活着才有希望！！
4楼2009-10-15 11:56:36
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sleepy

铜虫 (小有名气)
★
opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-15 15:35
引用回帖:
Originally posted by 温炎 at 2009-10-15 11:56:
不会吧!我们只有在换柱时,长时间没人使用时还有在使用缓冲液后,才会用到100%甲醇.
      梯度洗脱前没有用过纯的有机相去洗柱,,并根据前一次的流动相对平衡时间进行变动,好像对结果没有发现有什么大的影响呀!

我们一般也只是结束的时候用纯有机溶剂冲冲柱子 开始的时候就直接平衡了
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5楼2009-10-15 12:18:47
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
★ ★
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opq691(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流 10-15 15:35
一句话：有没有必要还要看使用情况！怎样使用
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我为新生
7楼2009-10-15 15:07:06
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竹轩书童

至尊木虫 (职业作家)

首席魔法师
不用。如果柱子最近用过可以直接用你梯度洗脱的初始浓度平衡好就行。
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8楼2009-10-15 15:36:46
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uliya809

木虫 (正式写手)
★
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每次做实验钱都是需要用高水和纯甲醇冲洗的，然后再用初始梯度平衡
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9楼2009-10-15 19:22:25
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jessicaxin20

金虫 (正式写手)
★
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呵呵，这个问题是老问题了反相柱分别用甲醇：水=90：10，纯甲醇，二氯甲烷做流动相依次冲洗
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年年岁岁总相依 岁岁年年用不离
10楼2009-10-15 19:44:36
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