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细胞消化的小技巧
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不一定要一次把所有细胞都要消化下来！ 晃动培养盘并在显微镜下用肉眼观察，只要70~80%细胞都收缩了或超过适合消化时间，就该终止消化反应，如果细胞量够即可进行后续传代或实验步骤；如果细胞量不够，则可视情况用不含钙、镁离子的平衡盐溶液清洗仍贴壁的细胞，再进行一次消化反应。 ▲ 消化不下来的细胞（黄）请视情况决定是否再消化一次。 不一定要吹打成完全单细胞悬液！ 一般细胞脱离培养底物、并经过5~10次轻柔吹打后，会在细胞悬液里形成小规模聚集(约5~10颗细胞)，所以不需要过度延长消化时间想让细胞完全分离成单细胞悬液。 消化效果不佳，先提升消化液浓度、再加长作用时间！ 当你选定了一种消化方式 (物理机械法除外)，发现效果不佳，首先应考虑提高EDTA或胰酶浓度，效果再不佳才加长消化的作用时间，避免细胞长时间浸泡在消化液中造成的细胞膜损伤。 （一般消化液使用：0.02%~0.04% EDTA作用5-20分钟；0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分钟） 结语 细胞消化 ，是一个看似很简单，但是有很多技术含量的步骤。消化好坏、是否污染、有无受伤，都在这短短的五六分钟里决定。 当我们已经可以顺利操作细胞培养实验，接下来要思考的，就是如何让细胞长得更健康、更均一、做出来的实验才会更完美。 祝各位的细胞都颗颗透亮、粒粒分明、活力旺盛！ 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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