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guard_lk木虫 (正式写手)
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[交流]
请问有谁用过杰能科公司的淀粉酶吗？
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我这里有两种杰能科公司的淀粉酶（液化酶和强效液体糖化酶），由于是从朋友那里拿来的没有说明书，现在朋友已经不在那里干了，所以也拿不到说明了。 想问下有谁知道酶活力单位AAU,GAU都是怎么定义的吗？ 由于该糖化酶是糖化酶与普鲁兰酶的混合酶，所以还想问下该怎样确定其酶活？ [ Last edited by zzgyb on 2009-11-4 at 15:06 ] |
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feizonglei
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2楼2009-10-14 15:10:01
feizonglei
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3楼2009-10-14 15:17:13
lwb1987521
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guard_lk(金币+1,VIP+0):不好意思，不是我要的 10-14 15:23
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酶活力单位（U，active unit） 酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定：1个酶活力单位是指在特定条件（25℃，其它为最适条件）下，在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量，或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。 酶活力单位：用来表示酶活力大小的单位，通常用酶量来表示。 其中一个称酶活力国际单位，规定为：在特定条件下，1分钟内转化1微摩尔底物，或者底物中1微摩尔有关基团所需的酶量，称为一个国际单位（IU，又称U）。 另外一个国际酶学会议规定的酶活力单位是Kat，规定为：在最适条件下，1秒钟能使1摩尔底物转化的酶量。 Kat和U的换算关系：1 Kat=6×107U， 1U=16067n Kat 酶的比活力（specific activity）：是指每毫克质量的蛋白质中所含的某种酶的催化活力。是用来度量酶纯度的指标。是生产和酶学研究中经常使用的基本数据。 酶的转化数(Kcat)：在单位时间内每一活性中心或每分子酶所能转换的底物分子数。生产中并不常用。 酶活力的测定方法 终点法 动力法 紫外可见分光光度法 荧光分光光度法 酶偶联法 电化学法 |
4楼2009-10-14 15:19:30
lwb1987521
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guard_lk(金币+1,VIP+0):这个，我有 10-14 15:29
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能让普鲁兰酶或者糖化酶其中一种失活就成了 哈哈 糖化酶活力测定 1.定义 1g固体酶粉（或1ml液体酶），于40℃、pH值为4.6的条件下，1h分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖，即为1个酶活力单位，以u/g（u/ml）表示。 2.原理 糖化酶有催化淀粉水解的作用，能从淀粉分子非还原性末端开始，分解α-1,4-葡萄糖苷键生成葡萄糖。葡萄糖分子中含有醛基，能被次碘酸钠氧化，过量的次碘酸钠酸化后析出碘，再用硫代硫酸钠标准溶液滴定，计算酶活力。 3.试剂和溶液 （1）乙酸－乙酸钠缓冲溶液（pH为4.6）。 称取乙酸钠（CH3COONa·3H2O）6.7g，溶于水中，加冰乙酸（CH3COOH）2.6ml，用水定容至1000ml。配好后用pH计校正。 （2）硫代硫酸钠标准溶液（Na2S2O3，0.05mol/L）。 （3）碘溶液（1/2I2，0.1mol/L）。 （4）氢氧化钠溶液（NaOH，0.1mol/L）。 （5）200g/L可溶性氢氧化钠溶液。 （6）硫酸溶液（2mol/L）。 （7）20g/L可溶性淀粉溶液。 （8）10g/L淀粉指示液。 4.仪器和设备 恒温水浴锅、秒表、比色管、玻璃仪器。 5.步骤 （1）待测酶液的制备 称取酶粉1～2g，精确至0.0002g（或吸取液体酶1.00ml），先用少量的乙酸缓冲液溶解，并用玻璃棒捣研，将上清液小心倾入容量瓶中。沉渣部分再加入少量缓冲液，如此捣研3～4次，最后全部移入容量瓶中，用缓冲液定容至刻度（估计酶活力在100～250u/ml范围内），摇匀。通过4层纱布过滤，滤液供测定用。 （2）测定 于甲、乙两支50ml比色管中，分别加入可溶性淀粉25ml及缓冲液5ml，摇匀后，于40℃恒温水浴中预热5min。在甲管（样品）中加入待测酶液2ml，立刻摇匀，在此温度下准确反应30min，立刻各加入氢氧化钠溶液0.2ml，摇匀，将两管取出迅速冷却，并于乙管（空白）中补加待测酶液2ml，吸取上述反应液与空白液5ml，分别置于碘量瓶中，准确加入碘溶液10ml，再加氢氧化钠溶液15ml，摇匀，密塞，于暗处反应15min。取出，加硫酸溶液2ml，立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，直至蓝色刚好消失为其终点。 （3）计算 X＝（A－B）c×90.05×32.2/5×1/2×n×2＝579.9×（A－B）c×n 式中 X——样品的酶活力（u/g或u/ml） A——空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积（ml） B——样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积（ml） c——硫代硫酸钠溶液的浓度（mol/L） 90.05——与1ml硫代硫酸钠标准溶液（1mol/L）相当的以克表示的葡萄糖的质量 32.2——反应液的总体积（ml） 5——吸取反应液的体积（ml） 1/2——吸取酶液2ml，换算为1ml n——稀释倍数 2——反应30min，换算成1h的酶活力系数所得的结果表示至整数   |
5楼2009-10-14 15:28:32
poscher
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杰科能的没用过。 酶活单位是AU，简称U。 AAU和GAU也找不到出处。 不过从下面一段话： 30 from Stern Enzyme) was found to contain 7.2 GAU/g and 4500 AAU/g. A further preparation sold as G-ZYMETM G998 by Enzyme Bio-Systems (used in Examples 3 and 4) contained 15.7 GAU/g and 840 AAU/g. Other enzyme preparations which have been investigated were SANAC 35 TASE (powder, Meiji Seika Kaishi Ltd) 1380 AAU/g and 123 GAU/g and MULTIFRESH (spray-dried variant of G998, Enzyme Bio-Systems) 119 GAU/g and 9356 AAU/g. 基本上，两者没有固定的比例。 |
6楼2009-10-14 19:05:47
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guard_lk
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