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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT-PCR引物如何检测
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ysywc

金虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR引物如何检测

各位虫友好，我最近在做real-timePCR，设计了一对引物，我PCR产物大小正确我把它链到PMD-18打算涂平板长出菌后寄出测序看看是不是我的目的片段，但是我现在涂板死活不长请问各位虫友是什么原因有何高见谢谢了

[ Last edited by amisking on 2009-10-14 at 11:58 ]
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1楼 2009-10-14 10:41:10
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
ysywc(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by ysywc at 2009-10-14 10:41:
各位虫友好，我最近在做real-timePCR，设计了一对引物，我PCR产物大小正确我把它链到PMD-18打算涂平板长出菌后寄出测序看看是不是我的目的片段，但是我现在涂板死活不长请问各位虫友是什么原因有何高见谢谢了

啥时候长过？
酶切过没有啊？
到底连上没有啊？

原因太多了，例如你的感受态失效了，你的抗生素用错了，。。。你没有连上。。。你保存的原始菌株死翘翘了。。等等。。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-10-14 11:54:10
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梧桐眼

金虫 (著名写手)
★ ★
ysywc(金币+1):谢谢参与
ysywc(金币+1,VIP+0): 10-14 17:05
蓝白斑

提取质粒，双酶切，电泳分析片段长度

菌落PCR 电泳看条带是不是你的目的片段 （看长度即可 ！）
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3楼2009-10-14 12:13:45
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★
ysywc(金币+1):谢谢参与
ysywc(金币+1,VIP+0): 10-14 17:05
引用回帖:
Originally posted by ysywc at 2009-10-14 10:41:
各位虫友好，我最近在做real-timePCR，设计了一对引物，我PCR产物大小正确我把它链到PMD-18打算涂平板长出菌后寄出测序看看是不是我的目的片段，但是我现在涂板死活不长请问各位虫友是什么原因有何高见谢谢了

[[ ...

怎么感觉你直接把连接产物涂了个平板
用不转化的感受态做个对照，看长不长。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
4楼2009-10-14 15:15:47
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