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手把手教你乳腺增生动物模型
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手把手教你乳腺增生动物模型 乳腺增生（Mammary Gland Hyperplasia，MGH）常见于25-40岁的中青年妇女，随着生活节奏加快、社会压力增大及受生育率下降的影响，其发病率逐年增高且占乳房疾病的75%。由不良精神刺激等因素引发，导致内分泌功能紊乱，雌孕激素比例失衡。在药物治疗上，最常用他莫昔芬，但副作用大，长期服用易致月经不调、闭经等不良反应。 一、动物的选择 主要为大、小鼠、家兔、豚鼠等。现以大鼠、小鼠、家兔更为常用。 二、造模方法 1、雌二醇与黄体酮制备大（小）鼠、家兔乳腺增生模型 1.1原理 内分泌及卵巢相关功能出现失调。雌激素与孕激素长期刺激乳腺组织，使其不能由增殖转入复旧，从而诱导乳腺组织增生。 1.2方法 ①雌性未孕SD大鼠，体重190～200g，大鼠按剂量-0.5mg·kg-1·d-1肌内注射苯甲酸雌二醇; 给药25d后按剂量4mg·kg-1·d-1肌内注射黄体酮，共计5d。于第31天可成功制备大鼠乳腺增生模型。该模型可维持不少于40d。 ②雌性未孕大鼠，体重220～250g，大鼠按剂量0.25mg·kg-1·d-1腹腔注射苯甲酸雌二醇，共计15次; 按剂量4mg·kg-1·d-1腹腔注射黄体酮，共计5d。第36天，可制备大鼠乳腺增生模型。该模型可维持不少于40d。 ③雌性小鼠，体重18～22g，小鼠按剂量0.5mg·kg-1·d-1腹腔注射苯甲酸雌二醇，共计25d; 随 后按剂量4mg·kg-1·d-1肌内注射黄体酮，共计5d。第31天可制备小鼠乳腺增生模型。该模型持续不少于40d。 ④未孕雌性新西兰白兔，体重2.0～2.5kg，家兔按剂量0.5mg·kg-1肌注苯甲酸雌二醇，每天1次，连续25d; 随后按剂量1mg·kg-1肌注黄体酮，隔天1次，共3次。于第31天可制备家兔乳腺增生模型。该模型持续不少于2周。 2、雌激素与孕激素联用 + 激怒刺激制备大鼠肝郁型乳腺增生模型 2.1原理 雌激素和孕激素联用可致大鼠乳腺增生，激怒可致大鼠出现肝郁，两者结合，可形成肝郁型乳腺增生模型。 2.2方法 6月龄大鼠，雌性，大鼠按剂量0.5mg·kg-1·d-1肌内注射苯甲酸雌二醇，连续25d; 随后肌内注射黄体酮（4mg·kg-1·d-1），共计5d。在第1次造模的同时，用鼠夹夹尾，激怒大鼠，刺激持续30min，每天1次，连续30d。于第35天可成功制备大鼠肝郁型乳腺增生模型。该模型持续不少于2周。 3、二甲基苯蒽（DMBA）+ 颈部佩带枷具制备大鼠肝郁血瘀型乳腺非典型增生模型 3.1原理 DMBA可使大鼠乳腺组织的终末芽体不是向腺泡芽体分化，而是呈现导管内增生。颈部佩带枷具可致大鼠出现神情痴呆、郁郁寡欢、反应迟钝、不爱运动，继而出现肝郁血瘀症状。两者结合，形成肝郁血瘀型乳腺非典型增生模型。 3.2方法 未育SD雌性大鼠，鼠龄为出生后40d左右。于造模第1天，按剂量100mg·kg-1一次性灌服DMBA，制作大鼠乳腺非典型增生模型。大鼠正常喂饲，于第1周大鼠颈部佩带枷具（选取直径4.5mm软硬适中的胶皮套铁丝制成枷锁，从一侧腋下环绕至颈部呈斜跨式，每24h左右交替佩戴，使之有束缚感，确保长时间佩戴并不伤皮毛），共8周。于第55天，制备肝郁血瘀型乳腺非典型增生模型。该模型持续不少于2周。 三、模型指标 1、病理学标：乳腺增生模型制备成功后乳腺组织会出现明显增生，乳腺小叶体积增大，乳腺小叶中腺泡及小导管出现扩张，小导管及小叶内腺泡数增多，互相靠近至融合; 腺泡的上皮细胞数目增多; 毛囊鞘根细胞中度增生，皮肤基底细胞增生成团块状，皮脂腺数增多。病理指标是乳腺增生的最直观证据，是乳腺增生模型成功与否的核心指标。权重系数设定为0.4。 2、表观指标：乳腺增生慢性的表观指标有大鼠第2或3对乳头竖起较坚实，有乳晕，乳头直径和高度显著增大，乳头竖起充血; 在第3周达肿胀高峰，第4周肿胀度持平，在第5周开始下降。动物易怒、易躁动。表观指标在乳腺增生疾病临床诊断中具有重要地位，是乳腺增生模型成功与否的直接相关指标，权重系数设定为0.3。 3、生化指标：多数乳腺增生造模成功后机体生化指标也会发生相应变化，如血清促性腺激素释放激素（Gn-ＲH），促卵泡激素（FSH），催乳素（PＲL），雌二醇（E2），5-羟色胺（5-HT）水平增加，血清孕酮（P）含量减少; 乳腺组织雌激素受体（EＲ），孕激素受体（PＲ）的蛋白表达量显著增加等。必要时加测血液流变学指标。生化指标是乳腺增生模型发生、发展、恢复过程的机体反映，检测指标多，是模型成功与否的间接相关指标，权重系数设定为0.3。 |
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