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倒平板小技巧
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培养基倾注温度 1、培养基倾注适宜温度约45℃。如果手心接触装培养基的三角瓶不烫，手背接触烫，此时的温度在45度左右，最适合倒平板。培养基倾注时温度太高的话，凝固时间较长，另外皿盖上会有大量冷凝水，不利于后续实验。温度太低，则容易出现倒板过程中瓶中培养基部分凝固的现象。如果要连续倒多个皿，尤其是在冬天，非常容易凝固，一旦凝固则需要再加热到较高温度才能溶化。所以建议此时开个50度的恒温水浴，随时可把装培养基的三角瓶放进去加热，效果会更好。 2、有些培养基需要加入添加成分，这些添加成分在加入前应先放置到室温，避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物。 3、目前多数实验室培养基灭菌后会放置水浴或者烘箱中，需使用的时候拿出来直接倒板。但培养基静置时间不宜过长，静置时间一般不超过4小时。静置时间过长，培养基中琼脂可能会少量凝固，形成类似絮状析出。 培养皿中有冷凝水 培养皿中有冷凝水，如果只有几滴，则影响不大，如果过多则需要引起注意。 1、倒皿前将平皿最好保持在35℃-40℃的温度（触手有温热感）。 2、当需要表面接种时，有冷凝水的平板表面容易产生蔓延菌落。这时可放在有对流的无菌净化台中吹干培养基表面，但不能过度干燥，否则培养过程中平板容易开裂。 3、如果是进行倾注平板计数，则可在凝固后的琼脂表面再覆盖一薄层琼脂培养基即可。 平板倾注量 一般平板倾注量在18-20mL左右，如果培养时间超过48小时或者是培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开裂，倾注量一般是25mL左右。倾注平皿时左三圈、右三圈的轻轻晃动，注意避让平皿盖。 平板气泡 倒板过程中容易出现气泡，特别是像BS琼脂这类需要摇匀后倒板的培养基。气泡过多的话会影响结果观察，所以在实验操作中尽量避免或减少气泡。 1、加热时培养基融化即可，避免温度过高产生气泡。 2、倒平板时尽量贴着平皿壁缓慢倒入，将气泡留在瓶子底部。 3、如果平板中有少量气泡的话，可以把气泡轻摇到平板壁上，这样不会影响结果观察。 公众号：毕合生物 毕合生物（www.bihebio.com)提供服务内容：分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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