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科研虫子小助手

新虫 (小有名气)

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[交流] 一文了解免疫组化（IHC）是什么？

免疫组化（immunocytochemistry，IHC）可以用来确定组织细胞内的抗原，对其进行定位、定性及相对定量的研究。免疫组化在病理诊断上的应用是在上个世纪七十年代开始的，目前其在病理诊断中的应用非常广泛，其已是组织形态学研究中不可或缺的一部分。

免疫组化的原理

免疫组化的原理是依赖抗原和抗体之间的特异性结合标示靶点分子。先将组织细胞或细胞中的某一种化学物质提取出来作为抗原，通过免疫动物后获得特异性抗体，在以此抗体去探测组织或细胞中的同类抗原物质。由于抗原与抗体是透明无色的，故需要借助于组织化学的方法将抗原-抗体结合的部位显现出来，以达到对组织或细胞中的未知抗原进行定位，定性及相对量的研究。

免疫组化的方法

采用免疫组化染色法，具体步骤为：

常规制备涂片制备

TBS缓冲液洗涤5min*3次

第一抗体，4℃冰箱过夜

TBS缓冲液洗涤，5min*3次

第二抗体，37℃，30min

TBS缓冲液洗涤，5min*3次。⑦ S-P复合物，37 ℃，30min

TBS洗涤液洗涤，5min*3次

DAB显色

流水洗涤

苏木素复染，酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。结果判定：细胞膜、胞浆或胞核内出现棕黄色颗粒为阳性（+）；深棕色颗粒为强阳性（++）；未显色者为阴性（-）

图片

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