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【实验技巧】丽春红染色
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丽春红(Ponceau S)染色是 WB 实验中的一个重要环节,今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。 丽春红染色作用 可用于 PVDF 膜,硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。 丽春红染色原理 丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。 丽春红特性 丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS 或其它适当溶液洗去。 为什么要用丽春红染色? 通过丽春红染色可验证转膜效率,及每孔上样蛋白总量是否均等,可以帮助后续实验进行内参调整或问题分析。 特别说明:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。 操作方法 1. 将转印膜浸没在丽春红染色液中,用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。 2. 取出转印膜,用去离子水冲洗膜直到背景干净(通常不超过 5 分钟),条带清晰,记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红,进行后续的 WB 检测。 公众号:毕合生物 毕合生物(www.bihebio.com)提供服务内容:分子生物学、免疫, 重组蛋白及ELISA相关、活性小分子化合物、高端化学、材料化学、细胞资源库与培养相关、生命科学、天然产物 |
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