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kx2599

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】保留时间变化?

利用Agilent1200分析匹莫苯丹,梯度洗脱,
流动相:A相:乙腈
              B相:缓冲液(一定浓度磷酸二氢钾溶液,用磷酸调PH=2.5)
早上9:00样品主峰保留时间为9分钟,下午14:30保留时间居然为15分钟,
难道是缓冲液PH值发生变化造成所分析的物质保留时间的变化?但是以前
保留时间很吻合啊!


后记:
现在又恢复正常了,之前我用A泵(缓冲液)、D泵(乙腈),后来
我换了B泵(乙腈)、C泵(缓冲液),并把所有通道用水、甲醇冲
洗了一段时间(不接色谱柱);我还发现在出现保留时间推后问题
时排气阀没有关紧,不知是不是也有这方面原因!

[ Last edited by kx2599 on 2009-10-15 at 17:00 ]
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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kx2599(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 10-13 16:19
洗脱程序是什么样的?

每次洗脱完,有没有用起始的相,稳定一段时间
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
2楼2009-10-13 14:56:52
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kx2599

金虫 (正式写手)

洗脱条件

T/min           A相:B相
   0             15:85
   6             20:80
   20            80:20
   20.1           15:85

[ Last edited by kx2599 on 2009-10-13 at 16:02 ]
3楼2009-10-13 14:59:56
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kx2599

金虫 (正式写手)

是啊!

每次分析完一个样品会用起始相稳定十几分钟啊!
4楼2009-10-13 15:03:02
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yuanshengjie

金虫 (小有名气)

行者

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kx2599(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 10-13 16:22
缓冲盐的存在pH值变化应该不大啊。
从头再来
5楼2009-10-13 15:17:54
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zhongweixu

铁杆木虫 (著名写手)

室温有没有变化?他可以明显影响保留时间.但不会相差这么大
6楼2009-10-13 15:24:45
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kx2599

金虫 (正式写手)

柱温恒定!

柱温已设为25摄氏度,有遇到过类似情况的吗?谢啦!
7楼2009-10-13 15:41:11
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hokka

金虫 (初入文坛)

★ ★
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kx2599(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 10-13 16:19
查查仪器的压力,可能是压力高了,压力高的原因可能是柱子脏了
8楼2009-10-13 15:44:28
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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kx2599(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 10-13 16:19
从上午9分钟变到下午14分钟,是逐渐变还是突然?

如果是突然,有可能是有一个泵的流量有问题了

ph变化的可能很小 ,而且不存在有机相挥发问题
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
9楼2009-10-13 15:46:14
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kx2599

金虫 (正式写手)

压力也很稳定啊!

有人建议用水、异丙醇冲洗缓冲液通道,若有磷酸盐留在通道会出现这种情形吗?想不明白啊!
10楼2009-10-13 15:50:23
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