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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 茚三酮显色法测总氨基酸，标曲的后两个点总是偏低是什么原因呢
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nilipangpang

新虫 (初入文坛)

[求助] 茚三酮显色法测总氨基酸，标曲的后两个点总是偏低是什么原因呢已有1人参与

茚三酮显色法测总氨基酸，标曲的后两个点总是偏低是什么原因呢？

试过延长反应时间，增大显色剂浓度都不行，uu们帮我看看呢。

编号                 0        1        2        3        4        5
氨基酸标液        0        1        2        3        4        5
柠檬酸缓冲液        1        1        1        1        1        1
1%茚三酮                1        1        1        1        1        1
60 ℃水浴15min                                               
60%乙醇定容后测吸光度                                               
                                               
序号                            1                    2             3                   4              5
吸光度                0.378        0.877        1.256        1.532        1.771

前面1-3号点的线性还挺好，3-5号点吸光度变化逐渐减小，显色剂浓度增加到2倍也是这样的。有没有uu解答一下，刷到过类似的贴子，但是存档了看不到，拜托大家帮我看看呢。谢谢！
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1楼2024-01-15 15:18:32
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nilipangpang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by czzlnkar at 2024-01-21 09:35:35
吸光度控制在0-1，改变处理方法，让曲线设计在那范围呢

您好，具体可以改哪些处理方法呢，尝试过改反应时间、水浴温度、缓冲液、是否定容，结果都不理想，还有哪些可以改吗？谢谢您？
赞一下 回复此楼
10楼2024-01-22 08:43:03
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温黁

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的标曲最高的一个点是不是太高了，全部降低一半浓度做呢？如果样品含量必须这么高，对应的把样品稀释一倍来做。我记得吸光度超过1就不太准了，好像
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慢慢来，工作是会一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件……做完的
5楼2024-01-16 11:59:26
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nilipangpang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 温黁 at 2024-01-16 11:59:26
你的标曲最高的一个点是不是太高了，全部降低一半浓度做呢？如果样品含量必须这么高，对应的把样品稀释一倍来做。我记得吸光度超过1就不太准了，好像

以前做过低浓度的，也是这个趋势。这个是把显色剂浓度加倍的结果，谢谢uu
赞一下 回复此楼
6楼2024-01-16 13:51:50
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温黁

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by nilipangpang at 2024-01-16 13:51:50
以前做过低浓度的，也是这个趋势。这个是把显色剂浓度加倍的结果，谢谢uu...

不客气
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慢慢来，工作是会一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件一件……做完的
7楼2024-01-16 15:47:34
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